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Agrociencia
On-line version ISSN 2521-9766Print version ISSN 1405-3195
Abstract
LOPEZ-HERNANDEZ, M. Siboney; PALACIOS-POPO, P. Eloisa and DE LA TORRE-ALMARAZ, Rodolfo. Detección de Cymbidium mosaic virus (CymMV) y Odontoglossum ringspot virus (ORSV) en orquídeas en México. Agrociencia [online]. 2014, vol.48, n.5, pp.525-536. ISSN 2521-9766.
En recorridos realizados en 2011 para la detección de enfermedades en orquídeas en invernaderos comerciales en el Estado de Morelos, se observaron plantas dañadas con moteados cloróticos, rayados tenues de color amarillo y manchas cloróticas y necróticas anulares. Hojas dañadas fueron recolectadas de plantas de los géneros Brassia, Brassocattleya, Cattleya, Encyclia, Epidendrum, Guariathe, Laelia, Oncidium, Shomburghia, Vainilla y Xilobium. Pruebas de detección serológica de proteína viral de doble anticuerpo (DAS)-ELISA) fueron realizadas con antisueros específicos para diversos virus que afectan a orquídeas. Al menos una planta de cada género presentó los virus Cymbidium mosaic virus (CymMV; Potexvirus) y Odontoglossum ringspot virus (ORSV; Tobamovirus), en infecciones individuales o mezcladas. Las plantas de Encyclia y Laelia estuvieron infectadas con mayor frecuencia con ambos virus. El patrón electroforético se determinó en geles de poliacrilamida (PAGE) del genoma del CymMV, con extractos de ARN viral de doble cadena de origen viral de las muestras positivas en los ensayos serológicos de DAS-ELISA. La identidad del CymMV y ORSV se confirmó mediante secuenciación directa y por clonación de productos diferentes de la transcriptasa inversa ligada a la PCR (RT-PCR) punto final, con oligonucleótidos degenerados, que amplifican dos regiones consenso del gene de la replicasa (RdRp) del género Potexvirus, y oligonucleotidos específicos, que amplifican una región conservada del gen de la proteína de la cápside (CP) de CymMV y ORSV. Clones del gen RdRp de tres plantas de Laelia (números de acceso Genbank HQ393958, HQ393959, HQ393960, HQ393961 y HQ393962), del gen CP de CymMV de dos plantas de Oncydium (números de acceso Genbank HQ393956 y HQ393957) y del gen CP de ORSV de tres plantas de Encyclia (números de acceso Genbank HQ393953, HQ393954 y HQ393955), fueron obtenidos y secuenciados. Las secuencias nucleotídicas del gen de la proteína de la cápside (CP) del CymMV y del CP del ORSV, obtenidos de las muestras de orquídeas que se cultivan en México, mostraron similitud de 96 a 97% con CymMV y de 99 a 100% con ORSV con secuencias disponibles en el Genbank, lo cual confirmó que los aislados de ambos virus de México son idénticos a los de otras partes del mundo.
Keywords : Replicasa (RdRp); RT-PCR; ornamentales.