Introducción

Las especies del género Tulostoma Pers. (Agaricomycetes, Agaricales) se distribuyen principalmente en zonas áridas y semiáridas, aunque algunas son exclusivas de zonas tropicales y/o templadas (^{Wright, 1987}; ^{Hernández-Navarro et al., 2020}). Forman basidiomas angiocárpicos con un saco esporífero constituido por dos capas, un ostiolo apical y un estípite bien definido, hueco y de textura semileñosa (^{Wright, 1987}). A nivel mundial se conocen 173 especies (^{Index Fungorum, 2023}), mientras que para México se han registrado 49 (Cuadro 1).

En Michoacán se han citado 37 especies de Agaricomycetes gasteroides, provenientes de regiones templadas del estado (^{Salinas-Rodríguez et al., 2018}), pero el conocimiento en general de los hongos de la región denominada como “Tierra Caliente” es limitado. Esta zona presenta áreas subhúmedas secas a semiáridas localizadas en el suroeste de Michoacán, extendiéndose hasta Guerrero y Estado de México (^{CPLADEM, 2020}). La precipitación anual en promedio es de 600 mm, aumentando a más de 1000 mm en las colinas que rodean el valle y disminuyendo hasta 400 mm en las zonas más secas (^{INEGI, 2003}; ^{CONAGUA, 2023}).

Durante visitas en la zona, un entusiasta conocedor de hongos local, el Sr. Fernando Pulido, mostró al autor varias fotografías de hongos observados en la región en diciembre de 2020. Una de las imágenes correspondió a un hongo gasteroide con exoperidio espinoso creciendo en madera (Fig. 1A), características no observadas en ninguna especie de Tulostoma conocida en México. Esto derivó en visitar la localidad casi dos años después, con el objetivo de recolectar especímenes que ahora soportan el primer registro de T. exasperatum Mont. en México. Se presenta una descripción macro- y micromorfológica de la especie, acompañada por fotografías de los esporocarpos incluyendo características microscópicas bajo el microscopio polifocal, compuesto y electrónico de barrido.

Figura 1: Tulostoma exasperatum Mont. A-B. ejemplares in situ; C. detalle del basidioma; D. verrugas del exoperidio; E. ostiolo; F. cuello; G. estípite. 

Materiales y Métodos

El espécimen estudiado se fotografió y recolectó en el rancho “Las Maravillas de Acahuato” en el municipio Apatzingán, Michoacán, México (Fig. 2). El sitio se localiza en 19°09'30.6''N y 102°20'20.4''O, a una elevación de 1112 m s.n.m., con clima cálido y sub-húmedo, con suelos tipo andosol y vegetación subtropical mezclada con pequeños parches de Pinus sp. (^{INEGI, 2003}). De acuerdo con ^{CONAGUA (2023)}, en Acahuato la temperatura varía entre 16-29 °C con una media de 23 °C, aunque se han registrado temperaturas de hasta 47.5 °C. La precipitación anual es de 1017.5 mm, distribuidas en promedio de 60 días, mientras que la evaporación llega a los 1834.9 mm.

Figura 2: Localidad de recolecta de especímenes de Tulostoma exasperatum Mont. en Michoacán, México. 

El material recolectado se caracterizó macro- y microscópicamente consultando literatura especializada (^{Wright, 1987}; ^{Baseia y Galvão, 2002}; ^{Calonge et al., 2013}). Los códigos entre paréntesis en los colores del basidioma corresponden a la carta de colores de ^{Kornerup y Wanscher (1978)}. Los detalles del basidioma se obtuvieron mediante el uso de un microscopio polifocal (Leica Z16 APO A, Wetzlar, Alemania) y fueron procesadas en el programa Leica Application Suite v. 4.3.0 (^{Leica Mycrosistems, 2023}). Las características microscópicas y sus medidas se obtuvieron montando fragmentos del basidioma y gleba en KOH al 10% y medio de Hoyer usando un microscopio óptico (MO) compuesto (OLYMPUS IX81, Tokyo, Japón) y las mediciones se realizaron en Image Pro Plus v. 7.0 (^{Media Cibernetics, 2023}). Una porción de la gleba se montó en cinta carbón y fue metalizada con oro-paladio en un equipo QUÓRUM Q 15 OR Rotary Pumped Coater (Lewes, UK) y observadas en un microscopio electrónico de barrido (MEB) (Hitachi SU 1510, Hitachi, Japón). Todas las fotografías y micrografías se obtuvieron en el Laboratorio Nacional de la Biodiversidad (LaNaBio). El mapa (Fig. 2) para la ubicación del sitio de muestreo se elaboró en el programa QGIS v. 3.22.3 (^{QGIS Development Team, 2023}). El material estudiado está preservado en la colección de hongos “Sala Psilocybe” del Herbario Nacional (MEXU) del Instituto de Biología, de la Universidad Nacional Autónoma de México.

Resultados

Taxonomía

Basidiomycota

Agaricomycetes

Agaricales

Agaricaceae

Tulostoma exasperatum Mont. Annls Sci. Nat., Bot., sér. 2, 8: 362 (1837) Figs. 1, 3.

Figura 3: Tulostoma exasperatum Mont. A-B. basidiosporas y capilicio al MO; C. células de las verrugas del exoperidio; D-F. basidiosporas al MEB.  

TIPO: CUBA. leg. Ramón de la Sagra en Herb. Montagne (holotipo: PC; parte del tipo en PRM).

Saco esporífero globoso deprimido, 11 × 7 mm; exoperidio con verrugas cónicas a piramidales, grandes y deciduas de hasta 1.5-2 mm, rodeadas por verrugas más pequeñas; verrugas color marrón rojizo a marrón oscuro (9D7-9E8); endoperidio papiráceo, blanco grisáceo (6A2) a amarillento (5A2), con marcas reticuladas en marrón grisáceo (6C5-6F5) resultado del desprendimiento de las verrugas del exoperidio; ostiolo fibriloso, elíptico, ligeramente proyectado; cuello inconspicuo, se observan verrugas del exoperidio apresando parcialmente el estípite; membrana no observada; gleba de color anaranjado claro (6A5-6A7), polvorienta a ligeramente algodonosa; estípite corto y delgado (10 × 2 mm), marrón rojizo a umbra (6F8-7F8), recto, con escamas recurvadas e involutas, terminando en un cordón micelial entremezclado con detritos y fragmentos de acículas de pino; basidios no observados; basidiosporas 5-6(-7) μm, globosas a subglobosas, amarillentas, reticuladas, con apariencia espinosa que observadas al MEB se distinguen por el retículo alado con cavidades irregulares y alas de apariencia membranosa; exoperidio con hifas pigmentadas, angulosas, entretejidas, septadas, con vesículas laterales esféricas a irregulares, metuloides a cistidioides, ligeramente más oscuras; endoperidio compuesto por hifas hialinas a ligeramente amarillentas, 4-5 μm de diámetro, con septos hinchados hasta 7 μm de ancho, con pared gruesa con lumen visible; estípite compuesto por hifas en empalizada, cortas, hinchadas y melanizadas, 13-17 × 6-7 μm en el exterior, mientras que las hifas internas son hialinas, más alargadas y delgadas, hasta 30 × 4-5 μm; capilicio similar a las hifas del endoperidio, hifas hialinas a ligeramente amarillentas 3-5 μm, lumen visible, septos ligeramente hinchados hasta 7 μm de ancho.

Hábito: lignícola, creciendo en madera en descomposición con pudrición cúbica, y dentro de la oquedad de una roca, la cual contenía una gran cantidad de hojarasca, acículas de pino y otros detritos.

Hábitat: Pantropical. África: Congo, Costa de Marfil, Ruanda, Zaire (^{Wright, 1987}). América: Argentina (^{Spegazzini, 1927}), Brasil (^{Lloyd, 1906}; ^{Rick, 1961}; ^{Bononi et al., 1984}; ^{Baseia y Galvão, 2002}; ^{Baseia y Milanez, 2002}), Cuba (^{Saccardo, 1888}; ^{White, 1901}); Hawaii, Estados Unidos de América (^{Long, 1947}); México (presente estudio), Venezuela (^{Dennis, 1970}). Asia: Filipinas (^{Long, 1947}; ^{Wright, 1987}), India (^{Long y Ahmad, 1947}), Singapur (^{Calonge et al., 2013}) y Tailandia (^{Paloi et al., 2023}).

Material estudiado: MÉXICO. Michoacán, municipio Apatzingán, Rancho “Las Maravillas de Acahuato”, 1112 m s.n.m., 19°09'30.6''N y 102°20'20.4''O, 25.XI.2022, leg. E. Hernández-Navarro y F. Pulido s.n. (MEXU 30550).

Notas taxonómicas: esta es una especie pantropical fácilmente reconocible por presentar hábito lignícola o en suelos con materia orgánica abundante; así como por su exoperidio verrugoso-espinoso marrón rojizo, ostiolo fibriloso y basidiosporas reticuladas y aladas. ^{Wright (1987)} clasificó a T. exasperatum dentro del subgénero Tulostoma, serie Fimbriata y sección Exasperata, de la cual es la especie tipo y cuyo diagnóstico consiste en exoperidio verrugoso y espinoso, formado por hifas cortas y retorcidas, y con ostiolo fibriloso o fimbriado. En esta sección también se incluyó a T. ridleyi Massee (=T. exasperatum var. ridleyi (Massee) J.E. Wright) y a T. transvaali Lloyd. La primera difiere por presentar basidiomas más robustos con estípite de hasta 120 mm, basidiosporas más grandes (6.4-8.1 μm) y distribución limitada al Sureste Asiático (^{Wright, 1987}). La segunda tiene sacos esporíferos más robustos de hasta 22 mm, basidiosporas de similar tamaño, pero con reticulación sin alas membranosas (^{Wright, 1987}). Por otro lado, esta última presenta hábito terrícola, desarrollándose en suelos arcillosos únicamente en Sudáfrica (^{Wright, 1983}).

De las especies de Tulostoma conocidas en México, T. opacum Long y T. portoricense J.E. Wright también presentan basidiosporas reticuladas. Sin embargo, T. opacum se distingue por presentar exoperidio membranoso y basidiosporas no aladas de mayor tamaño (7.9-11 μm) (^{Wright et al., 1972}; ^{Wright, 1987}; ^{Moreno et al., 1995a}). Mientras que T. portoricense difiere por presentar exoperidio hifal y basidiosporas más grandes (7-9 μm) (^{Wright, 1987}; ^{Esqueda et al., 1998}). Podría confundirse con T. exasperatosporum J.E. Wright descrita de Sudáfrica, que presenta basidiosporas muy similares; se separa de T. exasperatum por sus basidiosporas ligeramente más grandes (5.2-6.8 μm) y por el exoperidio membranoso, sin verrugas (^{Wright, 1983}). Tulostoma reticulatum G. Cunn. descrita de Australia, también tiene basidiosporas similares a las de T. exasperatum, pero presenta exoperidio hifal y su habitat es en suelos arenosos en aquel país (Wright, 1987). Tulostoma rickii Lloyd descrita de Brasil también presenta basidiosporas reticuladas, pero tiene exoperidio membranoso y se desarrolla en suelos subtropicales en Sudamérica (^{Wright, 1987}).

Otras especies en México con exoperidio verrugoso son T. dumeticola Long. y T. squamosum (J.F. Gmel.) Pers. En el resto del mundo, algunos otros ejemplos son T. domingueziae Hern. Caff., T. ahmandii H. Hussain & Khalid y T. matae Calonge & J. Carranza, reportadas para Argentina, Pakistán y Costa Rica, respectivamente; sin embargo, ninguna de estas tiene basidiosporas reticuladas, siendo todas equinuladas con espinas libres o fusionadas a manera de sub-retículo (^{Guzmán et al., 1992}; ^{Calonge y Carranza, 2003}; ^{Esqueda et al., 2004}; ^{Hernández Caffot et al., 2011}; ^{Hussain et al., 2016}).

Discusión

Aunque T. exasperatum es una especie muy distintiva por su morfología, la mayoría de sus reportes corresponden al siglo pasado, con excepción de los registros de este siglo para Brasil (^{Baseia y Galvão, 2002}; ^{Baseia y Milanez, 2002}), Singapur (^{Calonge et al., 2013}) y Tailandia (^{Paloi et al., 2023}). Es una especie típica de las zonas secas en Brasil, a diferencia de muchas otras especies de Tulostoma que se consideran raras y amenazadas en Europa, e incluso algunas especies se estiman regionalmente extintas (^{Jeppson, 2008}). En México existen taxones poco comunes, como T. portoricense y T. gracilipes J.E. Wright, que a nivel mundial solo se han registrado en dos o tres ocasiones, respectivamente (^{Esqueda et al., 1998}; ^{Piña et al., 2010}; ^{Hernández-Navarro et al., 2015}). Se desconoce el estatus de conservación de las especies de este género en México.

El hábito lignícola es una característica extremadamente rara dentro del género, ya que solo se tiene registrada a T. exasperatum y a T. ridleyii que ^{Wright (1987)} consideraba una variedad de la misma especie (=T. exasperatum var. ridleyii). La fotografía de los ejemplares observados en diciembre de 2020 (Fig. 1A) muestra varios basidiomas creciendo sobre madera en descomposición. Se observa pudrición cúbica-oscura, que es aquella en la que el hongo se alimenta de la celulosa de la madera, sin degradar lignina (^{Bao et al., 2023}). ^{Calonge et al. (2013)} reportan a T. exasperatum creciendo en suelo con abundante hojarasca. En Brasil se ha recolectado sobre madera de Mimosa tenuiflora (Willd.) Poir. y en Eugenia sp., en bosque de galería (^{Baseia y Galvão, 2002}; ^{Baseia y Milanez, 2002}). El material mexicano fue encontrado tanto en madera como en la oquedad de una roca de gran tamaño con abundante materia orgánica, ubicada en el cauce del arroyo que se encontraba seco al momento del muestreo.

La morfología de las células pigmentadas de las verrugas del exoperidio es una fuente de información taxonómica poco destacada por investigadores del género. ^{Wright (1987)} describe células organizadas “como un rompecabezas”, con base en el holotipo de T. exasperatum de Cuba y otros especímenes de países americanos, africanos y asiáticos, sin dar medidas de las estructuras. En los ejemplares de Singapur, se describen hifas de 3-6 μm, entremezcladas con esferocistos de hasta 15 μm de diámetro, con pigmento marrón intracelular (^{Calonge et al., 2013}). Ambas descripciones coinciden con el material mexicano estudiado. Los registros brasileños más recientes no presentan descripción de las células de las verrugas (^{Baseia y Galvão, 2002}; ^{Baseia y Milanez, 2002}), mientras que en el material tailandés se describe que las verrugas del exoperidio están compuestas por dos tipos de hifas: generativas (2.3-3 μm de diámetro) y esqueléticas (2.5-5 μm de diámetro), pigmentadas y con fíbulas, características no reportadas por otros autores. Tampoco se describen esferocistos, aunque solo se proveen dibujos de estas estructuras. Por otro lado, ^{Jeppson et al. (2017)} reportan que el género Tulostoma es crípticamente diverso, por lo que no sería sorpresa que al examinar material de T. exasperatum de distintos países y T. ridleyii, desde una perspectiva molecular, resulte en su segregación de dos o más especies.

Para Michoacán se han reportado 37 especies de hongos gasteroides, siendo Lycoperdon Pers. el más diverso con nueve especies (^{Salinas-Rodríguez et al., 2018}) y la presente contribución resulta ser el primer registro de Tulostoma para el estado. Las exploraciones futuras en esta región y otras zonas subhúmedas secas enriquecerán el conocimiento de los hongos en el estado y en el país.

Conclusiones

Hasta el momento, T. exasperatum se distribuye de manera amplia en zonas tropicales y subtropicales en el mundo. Presenta características morfológicas y ecológicas bien definidas, pero es necesaria su caracterización molecular para su validación como una sola especie y su ubicación filogenética dentro del género. La zona de Tierra Caliente michoacana presenta un gran potencial para el descubrimiento de registros y especies nuevas. El número de especies de Agaricomycetes gasteroides para Michoacán aumenta a 38 especies, mientras que el número de especies de Tulostoma para México aumenta a 50.