Introducción

En México las plantas medicinales constituyen uno de los principales recursos terapéuticos, en particular en zonas donde los servicios de atención médica son escasos, y la medicina tradicional se convierte en una alternativa médica eficaz para más de 40 millones de mexicanos (^{Osura, Tapia, y Aguilar, 2005, p. 16}). Una planta medicinal es un recurso que se emplea como tratamiento de alguna afección, en donde la parte de la planta empleada puede administrarse bajo diferentes formas, por ejemplo, como infusión, decocción, cataplasma, entre otras (^{Argueta-Villamar, 1994, p. 1127}).

El Estado de México es una entidad federativa del centro de la República Mexicana, conformada por 125 municipios, uno de ellos Ozumba, que limita al noreste con el municipio de Ayapango de Ramos Millán, al noroeste con Amecameca de Juárez, al este con Atlautla de Victoria, al oeste con San Esteban Tepetlixpa y Juchitepec de Mariano Riva Palacio y al sur, en una angosta franja con el estado de Morelos (http://elocal.gob.mx/work/templates/enciclo/EMM15mexico/municipio/15068a.html).

Tiene una extensión de 492.13 km² y presenta la forma de polígono irregular alargado de norte a sur, representando el 0.22% del área total del Estado de México (fig. 1). La cabecera municipal es conocida como la villa de Ozumba de Alzate o simplemente Ozumba de Alzate y se encuentra localizada en las coordenadas 19º02’21” de latitud Norte y 98º48’14” de longitud Oeste. Se ubica en la porción centro-norte del municipio con una extensión de 57 km² y una altitud de 2 340 m.s.n.m.

www.cuenntame.inegi.com.mx

Fuente: INEGI. Marco Geoestadístico Municipal 2010, versión 5.0

Nota: las divisiones incorporadas en este mapa corresponden al Marco Geoestadístico del INEGI

Fig. 1 Mapa del Estado de México. División municipal: en el recuadro punteado se muestra la localización del municipio de Ozumba (Modificado de http://cuentame.inegi.org.mx/mapas/pdf/entidades/div_municipal/mexicompios.pdf) 

Presenta una población de 27 207 habitantes distribuidos en 14 130 mujeres y 13 077 hombres (coespo_pdf_mirada12.pdf), quienes ejercen la agricultura como actividad principal de subsistencia (http://mexico.pueblomesoamerica.com./i/ozumba-de-olarte).

Dentro de sus cultivos permanentes y semipermanentes destacan el de maíz, haba, frijol y el de árboles frutales como la nuez de castilla, capulín, aguacate, tejocote, durazno, chabacano, manzana, membrillo, higuera, limón, pera, naranja, ciruela.

Además, se cultivan flores de cempasúchil, nochebuena, nube, alhelí, rosa, alcatraz, rayito y lirio. Dentro de las plantas medicinales existentes se encuentran la yerbabuena, la menta, el anís de campo, la prodigiosa, la tronadora, el cedrón, la manzanilla, el toloache, el cilantro, el chichicastle y el gordolobo (http://www.edomex.gob.mx/legistelfon/doc/pdf/gct/2004/jun283.pdf).

Dentro de la flora silvestre de México y Guatemala, se encuentra el género subcosmopolita Geranium (Geraniaceae), el cual comprende con alrededor de 300 especies, entre ellas, Geranium seemannii Peyr (^{Arreguín-Sánchez, 2001, p.324}). Dentro de la República Mexicana se distribuye en los estados de Chiapas, Coahuila, Colima, Distrito Federal, Durango, Guerrero, Hidalgo, Jalisco, Estado de México, Michoacán, Nuevo León, Oaxaca, Puebla, San Luis Potosí, Tamaulipas, Tlaxcala y Veracruz.

Habita en climas semisecos, secos y templados de los 1000 hasta los 3900 m.s.n.m.; crece en terrenos de cultivo abandonados, a orillas de los caminos, asociada al bosque mesófilo de montaña, de encino, de pino, mixtos de pino-encino y de juníperos. (http://www.conabio.gob.mx/malezasdemexico/geraniaceae/geranium-seemannii/fichas/fichas.htm).

Se han descrito diversos trabajos taxonómicos florísticos sobre G. seemannii (^{Hanks, y Small, 1907, p. 18}); (^{Knuth, 1912, p. 220}); (^{Moore, 1943, p.56}); (^{Standley, y Steyermark, 1946, p. 370}); (^{Arreguín-Sánchez, 2001, pp. 324-325}); (^{Rzedowski, y Calderón de Rzedowski, 1995, p. 31}); (^{Utrera-Barillas, 2000, p. 28-31}); (^{Aedo, 2001, p.33}).

En la tabla 1 se resumen algunos de los estudios publicados referentes a la especie, así como su asociación con otras especies biológicas.

Desde el punto de vista farmacológico, han reportado la evaluación de la actividad diurética en ratas adultas Wistar macho del extracto etanólico de la parte aérea de G. seemannii, recolectada en el municipio de Epazoyucan, Hidalgo, México (^{Montejano-Rodríguez, Almaguer-Vargas, Gayosso-De-Lucio, Ocharan, Moreno, Hernández,… Sierra, 2013, pp. 709-713}). La administración de 25 y 50 mg/kg de p.c., per os, provocó un incremento superior de la excreción urinaria de iones sodio, potasio y cloruro, en comparación al grupo control, aunque fue menor que con el tratamiento con furosemida (20 mg/kg de p.c., i.p.). Este efecto se le atribuyó potencialmente a la presencia de metabolitos secundarios que han sido descritos en otras especies endémicas del estado de Hidalgo, como taninos y flavonoides, principalmente elagitaninos, como la geranina aislada de G. thunbergii Sieg et Zucc.

Por otro lado, Gayosso de Lucio (1 mar. 2014) describe acerca de G. seemannii, que, al preparase una infusión de la planta (3 g/250 mL), se pueden obtener alrededor de 36.5 mL de ácido elágico, el cual presenta actividad antitumoral y antihipertensiva [Además, reporta que, de diversas especies de geranio recolectadas en la localidad de El Guajalote, municipio de Epazoyucan; ha sido posible aislar diversas sustancias con actividad farmacológica, entre ellas, la geranina, que es el compuesto responsable de la actividad de esta especie]. Recuperado de https://agendahidalguense.com/tag/geranium-seemannii

Con base en la información anterior, en el presente trabajo se planteó como primer objetivo realizar la recolección y el estudio etnobotánico de G. seemannii en la comunidad de Ozumba de Alzate, municipio de Ozumba, Estado de México, ya que su población reporta el uso empírico de la especie. Por otro lado, considerando la información obtenida y los estudios previos, se planteó como segundo objetivo, evaluar la actividad antiinflamatoria el extracto acuoso de toda la planta mediante un modelo experimental de inflamación crónica en ratas, denominado modelo del granuloma; con la finalidad de proporcionar datos científicos que corroboren el uso tradicional medicinal de esta especie.

Método

Estudio etnobotánico

Se realizó en la comunidad de recolecta, haciendo uso de un ejemplar previamente identificado de G. semannii (fig. 2). La técnica etnobotánica que se utilizó fue la de ^{Kvist, Oré, González, y Llapapasca (2001)}, que consiste en obtener de la población la mayor información a partir de su participación activa, esto permite el acceso a la realidad de los sujetos de estudio mediante la convivencia con su cotidianeidad. Se realizaron entrevistas de tipo abierto y cerrado con las personas que estuvieran dispuestas a colaborar, para lo cual se usó un cuestionario, que de forma general incluye preguntas relacionadas al uso tradicional, a la parte utilizada, la frecuencia y modo de uso, y cantidad utilizada de la planta (^{Vázquez-Ramírez, Meléndez-Camargo, y Arreguín-Sánchez, 2005, p.110}).

Fig. 2 Geranium seemannii: aspecto general de la planta (izquierda-arriba), detalle de flores y frutos (izquierda-abajo); A. ilustración del aspecto general de la planta; B. flor; C. flor desprovista de pétalos; D. gineceo (derecha) (^{Rzedowski, y Calderón de Rzedowski, 1995, p. 31}) 

La entrevista abierta consistió en charlar con nuestro interlocutor o interlocutores, anotando sus comentarios, pasando de un tema a otro de acuerdo con la marcha de la charla; mientras que la entrevista cerrada se ajustó al cuestionario previamente elaborado, en donde las preguntas se fueron sometiendo al interlocutor y se anotaron las respuestas. ^{Bohrer (1986, p. 38}) observó que, en este tipo de entrevistas, los interlocutores se sentían con menos confianza, menciona que los diálogos resultan muy forzados, sin embargo, proporcionan información que puede ser estandarizada.

La realización de la encuesta se diseñó para un máximo de cinco minutos por interlocutor, sin embargo, de acuerdo a la cantidad de conocimientos y experiencias que las personas tenían con relación a la planta, y su disponibilidad para brindar información, el tiempo fue ajustado. ^{Lininger, y Warwick (1982, p. 405}) indican que el propósito de las encuestas no estadísticas es esperar obtener un censo de los temas, una tipología e indicaciones del vocabulario usado de acuerdo con la concepción de la encuesta; y para ello, es suficiente la aplicación de veinte encuestas, ya que las demás solo confirmarían lo que ha aportado el análisis de las primeras.

Resultados

Estudio etnobotánico

Se realizaron 33 encuestas a personas adultas de la población que accedieron a contestar la encuesta y que previamente refirieron conocer la planta después de mostrarles un ejemplar previamente identificado. El nombre común con el que se conoce a la especie es “pata de león” y se utiliza tradicionalmente para tratar principalmente la inflamación (11% de riñón; 17% en general; total 28%); mientras que otros usos se relacionan con el dolor de riñón (23%), muela (9%), fiebre (14%) y sarpullido (12%) (fig. 3).

Fig. 3 Usos tradicionales de Geranium seemannii Peyr. en la comunidad de Ozumba de Alzate, Estado de México: se muestra el porcentaje de uso reportado por la población (n = 33). 

Por otro lado, el 16% recurre al consumo de la raíz, las hojas y los tallos, respectivamente; mientras que el 52% refiere el uso de toda la planta como “agua de uso”, la cual ingieren durante el día, por un cierto tiempo para minimizar o aliviar los malestares (fig. 4). Cabe destacar, que la raíz la mastican para calmar los dolores de muelas, mientras que las hojas y los tallos los utilizan como “agua de uso”.

Fig. 4 Partes utilizadas de Geranium seemannii Peyr en la comunidad de Ozumba de Alzate, Estado de México: se muestra el porcentaje reportado por la población (n = 33). 

Es importante mencionar, que el 65% de las personas utilizan la planta seca, colocando un puño o una ramita de la planta en un litro de agua, la cual ponen a ebullición para su posterior consumo.

Con base en estos resultados, para la evaluación farmacológica se utilizó la planta seca completa y se preparó diariamente una decocción, para corroborar el uso tradicional antiinflamatorio atribuido a la especie.

Evaluación de la actividad antiinflamatoria

En la evaluación farmacológica se utilizó el modelo del granuloma, el cual permite evidenciar experimentalmente las diferentes fases del proceso inflamatorio crónico.

Se observó (fig. 5) que el grupo tratado con la indometacina (5 mg/kg de p.c.) fue capaz de disminuir (P < 0.05) la fase exudativa y proliferativa de la inflamación, representada por el peso húmedo y seco del granuloma.

Fig. 5 Efecto antiinflamatorio del extracto acuoso de Geranium seemannii Peyr en el modelo del granuloma en ratas: las barras representan la media ± error estándar; Exto. aq = extracto acuoso de G. seemannii (dosis); n = 6 ratas por grupo; * P < 0.05 vs grupo tratado con bicarbonato de sodio 5%. 

Con relación al tratamiento con el extracto acuoso de G. seemannii, se observó que las tres dosis evaluadas (125, 250 y 500 mg/kg de p.c.), mostraron actividad antiinflamatoria, evidenciada con una disminución estadísticamente significativa (P < 0.05) en el peso húmedo y seco del granuloma.

En el caso del peso final del granuloma, a pesar de que se observó una disminución con la administración del extracto acuoso, no se alcanzó significancia estadística.

Por otro lado, se conoce que uno de los principales efectos adversos atribuidos a los antiinflamatorios, es el daño al tracto gastrointestinal, por lo que, en el presente estudio se diseccionó el estómago y duodeno de las ratas administradas con los diferentes tratamientos.

Como se observa en la figura 6, el tratamiento con indometacina provocó que la formación de úlceras gástricas, así como adelgazamiento y cambios en la coloración del tejido. Por otro lado, los grupos tratados con bicarbonato de sodio al 5%, así como con las diferentes dosis del extracto acuoso de G. seemannii, no mostraron inducir daño a la mucosa gastroduodenal, incluso a dosis 100 veces mayores que las utilizadas con la indometacina.

Fig. 6 Fotografías de estómago y duodeno de ratas tratadas con bicarbonato de sodio al 5% (A), indometacina (5 mg/kg de p.c.; B) y el extracto acuoso de G. seemannii (125, 250 y 500 mg/kg de p.c.; C, D y E, respectivamente). 

Discusión

G. seemannii Peyr es una planta conocida en México y Guatemala con diversos nombres comunes; en la comunidad de Ozumba de Alzate, municipio de Ozumba, Estado de México, en donde se realizó el presente estudio, se le conoce como “pata de león”.

La etnobotánica es una disciplina que en su concepción más amplia estudia el lugar de las plantas en la cultura y la interacción directa de las personas con las plantas, principalmente en los pueblos indígenas y las culturas rurales; ya que esta relación es más estrecha (^{Pardo de Santayana, y Gómez, 2003, p. 178}).

En el caso de G. seemannii, trabajos previos coinciden en que es una planta originaria de México que se ha utilizado como medicinal en varias localidades del país, para tratar diversos malestares, entre ellos, el dolor de estómago, la bilis, los cólicos por coraje, la diarrea, el dolor de muelas, la inflamación de estómago, la urticaria infantil, las escaldaduras de niños, la sarna, las heridas y la tos (^{García, 1981, p.98}); (^{González, 1981, p. 158}); (^{Senties, 1984, p. 123}); (^{Argueta-Villamar, 1994, p.1127}); (^{Mendoza, y Lugo, 2010, p.430}); (^{Carrasco-Hernández, 2011, p.119}).

En este trabajo, se realizó el estudio etnobotánico en la comunidad de Ozumba, ya que la población refiere el crecimiento natural y el uso tradicional de esta planta para diversas afecciones, además, de que no se encontraron datos bibliográficos que avalaran científicamente los usos de G. seemannii en esta población mexicana.

Los resultados de este trabajo indican que la planta conocida como “pata de león” por la comunidad, corresponde botánicamente a Geranium seemannii Peyr. (^{Rzedowski & Calderón de Rzedowski, 1995, p.31}), reportan que la taxonomía de Geranium es difícil, ya que mientras muchas de sus especies presentan alto grado de variabilidad, con frecuencia difieren entre sí en unos cuantos caracteres, que no siempre son fáciles de observar.

De acuerdo a las encuestas realizadas, el mayor porcentaje utiliza a la planta para tratar los signos y síntomas relacionados a la inflamación y el dolor (23% dolor de riñón; 17% inflamación en general; 14% dolor de estómago; 14% fiebre; 11% inflamación del riñón; 9% dolor de muelas).

Por otro lado, el 12% de la población utiliza a la planta para tratar el sarpullido, una enfermedad inflamatoria de la piel, muy común en niños pequeños; caracterizada por lesiones cutáneas que se producen por la obstrucción de los conductos excretores de las glándulas exocrinas (^{Galiano, y Usatorres, 2012, pp. 64-65}).

Un dato relevante y que no había sido citado previamente, es que en esta comunidad acostumbran masticar la raíz de la planta para tratar el dolor de muelas.

La población utiliza en su mayoría toda la planta seca, lo que facilita su conservación y permite obtener los beneficios terapéuticos de todos los metabolitos secundarios contenidos en las partes de la planta.

Considerando estos resultados y debido a que existen pocos trabajos que corroboren experimentalmente las actividades farmacológicas atribuidas a G. seemannii, se realizó un análisis fitoquímico preliminar que permitió detectar cualitativamente la presencia de metabolitos secundarios con propiedades terapéuticas, entre ellas, la antiinflamatoria, como son los taninos (^{Adedapo, Sofidiya, & Afilayan, 2009, p.1198}); las saponinas (^{Sawadogo, Boly, Lompo, Some, Lamien, Guissou, y Nacoulma, 2006}, 438); los flavonoides (^{Márquez y otros, 2008, p. 24}); (^{Márquez-Flores, Montellano-Rosales, Campos-Aldrete, y Meléndez-Camargo, 2009, p. 13}); (^{Zaa, Valdivia, y Marcelo, 2012}, p332); (^{Hernández, Silva, Buendía, Ramos, Cardona, Villarreal, y Meléndez, 2003, p.28}) y las cumarinas (^{Márquez y otros, 2008, p.24}).

Por otro lado, también se ha reportado que las cumarinas presentan actividad antioxidante, que se atribuye a su habilidad para atrapar radicales libres y de quelar metales. Así como los taninos, a quienes también se les atribuyen propiedades analgésicas (^{Savithramma, Linga & Suhrulatha, 2011, p.581}).

Con respecto a la evaluación de la actividad antiinflamatoria, se utilizó un modelo muy utilizado en la investigación denominado modelo del granuloma, el cual permite representar la fase crónica de la inflamación, la cual se inicia con la presencia de células proliferativas epiteloides en la zona de inserción de un antígeno (por ejemplo, un pellet de algodón). Este pellet, estimula al sistema inmune y a la producción de anticuerpos o de interleucinas, lo que trae como consecuencia, la proliferación de linfocitos y la formación de tejido de granulación que tiende a delimitar el pellet (^{Odabasoglu, Halici, Aygun, Halici, Atalay, Cakir, & Suleyman, 2011, p.32}); (^{Márquez-Flores, Campos-Aldrete, Salgado-Zamora, Correa-Basurto, & Meléndez-Camargo, 2012, p. 3496}).

Durante este proceso, se da una fase trasudativa o exudativa, que se relaciona con el escape de líquidos con un bajo contenido proteico (exudado), lo que se evidencia por el incremento en el peso húmedo del granuloma (^{Collins, 1999, p. 21}); (^{Núñez, Montero, Agüero, y Muñoz, 2007, p.551}), mientras que la eficacia de la actividad antiinflamatoria, en los procesos crónicos, se relaciona con la habilidad de los tratamientos para inhibir el incremento en el número de fibroblastos durante la formación del tejido de granulación (fase proliferativa) (^{Kale, Misar, Dave, Joshi, & Mujumdar, 2007, p.303}) evidenciada por el peso seco y final del granuloma.

En este estudio se utilizó como fármaco de referencia a la indometacina, el cual ha sido utilizado en otros estudios (^{Adedapo y otros, 2009, p. 1195}), ya que presenta su actividad antiinflamatoria mediante la inhibición de la vía de las ciclooxigenasas y, por tanto, la formación y liberación de las prostaglandinas (^{Leza, y Lizasoin, 2004, p. 514-515}); así como por inducir un decremento de la adhesión y migración de leucocitos sobre el pellet (^{Lee, y Katayama, 1993, p.394}); mecanismo que fue consistente con la disminución del peso húmedo en el modelo utilizado.

En el caso del extracto acuoso de G. seemanii, se observó que las tres dosis evaluadas (125, 20 y 500 mg/kg de p.c.), fueron capaces de disminuir la fase exudativa y proliferativa de la inflamación, al observarse una peso húmedo y seco menor, en comparación al tratamiento con bicarbonato de sodio al 5%.

A pesar de que se utilizaron dosis crecientes del extracto, no se observaron diferencias estadísticas entre ellas, por lo que no hubo un efecto dosis-dependiente o el fenómeno de hormesis, en el que se ha visto que a dosis bajas se presenta efecto farmacológico que se pierde a dosis elevadas de la planta (^{Calabrese, & Blain, 2009, p.45}).

El efecto de la planta, pudiera deberse a la presencia de los metabolitos secundarios antes descritos, principalmente, de los flavonoides, ya que como lo menciona (^{Zaa y otros, 2012, p.332}), estas moléculas reducen la concentración de proteínas y células polimorfonucleares presentes en el exudado y el tejido fibroso.

En el estudio macroscópico del tracto gastroduodenal fue evidente el daño a la mucosa gastroduodenal inducida por la indometacina, la cual inhibe a la isoforma constitutiva de la ciclooxigenasa, la COX-1, presente en el estómago; provocando la disminución de la biosíntesis de prostaglandinas cito protectoras (^{Feria, 1997, p. 357}).

El extracto acuoso de G. seemannii no produjo daño gastroduodenal a ninguna de las dosis utilizadas, probablemente debido a que los flavonoides pudieron haber contribuido a la protección del epitelio gástrico, ya que existen estudios que indican que dichos metabolitos poseen la capacidad de inhibir con alta potencia la actividad de las bombas de H⁺ y K⁺ ATPasa, responsable de la producción de las secreciones ácidas del estómago (^{Baggio, Freitas, Otofuji, Cipriani, Souza, Sassaki,…Mesia-Vela, 2007, p. 438}).

Por otro lado, otras especies de la familia Geraniaceae han mostrado actividad antiinflamatoria, tal es el caso del estudio realizado a un extracto etanólico de la raíz de Biebersteinia multifida DC, el cual mostró actividad analgésica y antiinflamatoria en el modelo agudo del edema inducido con carragenina (^{Farsam, Amanlou, Dehpour, y Jahaniani, 2000, p. 446}). De igual forma el extracto acuoso de la parte aérea de Geranium pratense subsp. finitimum (Woronow) Knuth mostró disminuir la inflamación aguda inducida en ratones con carragenina, prostaglandina E₂ (PGE₂) y 12-O-tetradecanoilforbol 13-acetato (TPA, por sus siglas en inglés). Esta actividad se relacionó con su contenido de compuestos fenólicos (^{Küpeli, Tatli, Akdemir, y Yesilada, 2007, p. 239}).

(^{Lu, Li, Li, Liang, & Shen, 2012, p. 195}) demostró la actividad antiinflamatoria en el modelo de TPA de la fracción de acetato de etilo aislada del extracto acuoso de Geranium nepalense. Así mismo, aislaron seis compuestos polifenólicos, incluyendo a tres flavonoides (kaemferol, kaemferol-7-O-(-D-glucopiranósido, quercetina-7-O-α-ramnopiranósido); dos taninos (pirogalol y ácido gálico); y una lignina (epipinoresinol). Lo que demuestra que la presencia de compuestos polifenólicos en especies de esta familia, pudiera ser la responsable de su actividad farmacológica.

Conclusiones

En el presente estudio se corroboró el crecimiento de la especie identificada botánicamente como Geranium seemannii Peyr, conocida comúnmente como “pata de león”, en la comunidad de Ozumba de Alzate, Estado de México. Así mismo, se evidenció el uso tradicional medicinal de toda la planta seca como “agua de uso” para padecimientos relacionados al dolor y la inflamación.

El extracto acuoso de toda la planta seca presenta glucósidos cardiacos, quinonas, azúcares reductores, taninos, flavonoides, cumarinas y saponinas; los cuatro últimos reconocidos por sus propiedades antiinflamatorias; las cuales fueron corroboradas al observar una disminución del peso del granuloma en ratas inducido por el tratamiento con el extracto a las dosis de 125, 250 y 500 mg/kg de p.c., sin inducir daño macroscópico gastroduodenal.

Es evidente que los datos etnobotánicos recabados concuerdan con la actividad antiinflamatoria evaluada de la especie, sin embargo, es importante continuar con la caracterización química de los componentes del extracto, así como de los mecanismos bioquímicos involucrados en su actividad terapéutica.