Introducción

Las Rhamnaceae fueron delimitadas por ^{Jussieu (1789)} y ^{Brongniart (1827)} subdivide a la familia en cinco tribus de las cuales cuatro están presentes en México: Colletieae, Rhamneae, Ziziphae y Gouanieae; en esta última es donde se encuentra Gouania (^{Fernández, 1993, p. 7-8}). El género fue establecido por ^{Jacquin en (1763)}, el nombre deriva del apellido Antonie Goüan, 1733-1821, botánico y médico francés y el mismo fue adoptado por Linneo en 1763 (^{Pool, 2014a, p. 490}).

Gouania es un género patropical de aproximadamente 50 especies (^{Pool, 2014a, p. 490}) distribuidas en regiones tropicales y subtropicales de América, África, Asia, Australia y Oceanía. En América se localizan desde Norteamérica hasta el Río de la Plata en Argentina (^{Cusato & Tortosa, 2013, p. 21}). Las características diferenciales es que son arbustos usualmente trepadores, ramas delgadas, estriadas, comúnmente provistas de zarcillos; hojas alternas, lámina foliar ovada a elíptica, con frecuencia membranosa, el margen entero o dentado, venación pinnada o con tres nervios, pecíolo presente; inflorescencias terminales o axilares, a manera de espiga, panícula o racimo, con el raquis frecuentemente terminado en zarcillo; flores polígamas, blanquecinas, pequeñas de 0.3 a 1.3 mm, cáliz con un tubo corto, obcónico, sépalos 5, pétalos 5, cuculiformes envolviendo a los 5 estambres, ovario trilocular; fruto coriáceo, con el cáliz persistente a manera de corona, indehiscente, trialado (^{Fernández-Nava, 1986}).

El género Gouanua ha sido estudiado en revisiones taxonómico-florísticas dentro de la familia Rhamnaceae por ^{Standley (1923)}; ^{Johnston (1971)}; ^{Wiggins (1980)}; ^{Fernández (1986}, ¹⁹⁹³, ¹⁹⁹⁶); (^{Acevedo-Rodríguez, (2003)}; ^{Cusato & Tortosa (2013)} y (^{Pool, 2014a}; ^2014b). Entre los trabajos relacionados a la anatomía y arquitectura foliar de las Rhamnaceae se consultaron los de ^{Meyer & Meola (1978)}; ^{Schirarend, (1991)}; ^{Colares & Arambarri, (2008)} y ^{Shisode & Patil (2011)} de anatomía de la madera. El interés de este estudio fue describir la arquitectura y la anatomía de la epidermis de las hojas de las especies de Gouania (Rhamnaceae) que prosperan en México para dilucidar su valor taxonómico.

Materiales y método

El material vegetal utilizado para el estudio se encuentra depositado en los Herbarios de la Escuela Nacional de Ciencias Biológicas del Instituto Politécnico Nacional (ENCB) y también se examinaron especímenes del Herbario del Instituto de Biología de la Universidad Nacional Autónoma de México (MEXU). La identificación de los taxones fue confirmada por el Dr. Rafael Fernández Nava especialista en Rhamnaceae. Las exsicatas estudiadas fueron: Gouania conzattii, Conzatti s/n (ENCB); McVaugh 2245 (ENCB); Schoenwetter J50x-105 (ENCB). G. eurycarpa, Nieto y col. 337A (ENCB); Cabrera y Cabrera 3969 (ENCB); López 1270 (ENCB). G. guiengolensis Fernández 586 (MEXU); Sánchez, With y Trujillo 998 (MEXU); Torres y col. 998 (MEXU). G. lupuloides, Bonfil 141 (ENCB); Téllez 11283 (MEXU); Rzedowski 14772 (ENCB). G. obamana, Ventura 12420 (ENCB); Acosta 2351 (ENCB); Ibarra y Sinaco 1251 (ENCB). G. polygama, Rzedowski 14621 (ENCB); Paray 2062 (ENCB); Menéndez et al. 409. G. pubidisca Matuda 16966 (MEXU); Aquino 112836 (MEXU); Téllez 207 AA (MEXU); G. rosei, Soto 75 (MEXU); Calónico 4741 (MEXU); Calónico 5838 (MEXU). G. stipularis, Perino 3218 (ENCB); Kruse 114 (ENCB); Paray 2658 (ENCB). G. velutina, López 82 (MEXU).

De cada especie se tomaron dos hojas maduras totalmente extendidas situadas entre el tercero y quinto nudo de las ramas montadas en las muestras de herbario de tres ejemplares de cada especie y que de preferencia, se distribuyeran en diferentes tipos de vegetación con base en los datos de las etiquetas de herbario. Las hojas completas de cada una de las especies fueron diafanizadas por separado mediante la técnica de ^{Aguirre-Claverán y Arreguín-Sánchez (1988, p. 11)} . Las láminas aclaradas siempre permanecieron en cajas de Petri con agua y se tomaron fotografías de este material. Posteriormente una parte de las hojas contenidas en el material de vidrio antes referido, fueron teñidas con dos gotas de azul de metileno comercial fish care por un minuto y después se pasaron a otra caja con agua. A la otra parte de las láminas foliares se les añadió dos gotas de safranina por dos minutos y se colocaron en cajas de Petri con agua. Se tomaron fotografías de este material. La arquitectura foliar se describió bajo un microscopio estereoscópico American Optical utilizando diferentes aumentos para describir las venas de primera, segunda, tercera y cuarta categoría, posición de los tricomas y presencia de estructuras glandulares. Las fotografías se tomaron con una cámara digital Samsung Hmx-e10 con 8 megapixeles.

Posteriormente se hicieron cortes de 1 cm de porciones de las hojas teñidas con azul de metileno y safranina que se colocaron en diferentes portaobjetos y como medio de montaje se utilizó una solución de miel de maíz con agua 1:1 y trazas de fenol, después se cubrieron con los cubreobjetos y se sellaron con barniz transparente, una vez seco el esmalte se etiquetaron las preparaciones. Estas observaciones anatómicas se realizaron en un microscopio óptico binocular Zeiss y así se describieron los caracteres epidérmicos y se tomaron fotomicrografías con una cámara digital Samsung Hmx-e10 con 8 megapixeles.

Para las descripciones de la arquitectura foliar se tomaron en consideración los trabajos de ^{Hickey (1973}, ¹⁹⁷⁴⁾, ^{Dilcher (1974)}, (^{Hickey & Wolfe (1975)}, ^{Gomes Bezerra, Soares Silva, & Gomes 2011}) y para la epidermis foliar se consideraron los criterios de ^{Gola, Negri, & Cappelletti (1965)}; ^{Cortés (1982)} y ^{Azcárraga, Bonfil, Jácquez & Sandoval (2010)}. Los caracteres que se tomaron en consideración son los del Cuadro 1.

Con base en las preparaciones semipermanentes que se elaboraron se midieron cinco tricomas e igual número de estomas de cada especie y espécimen, en las descripciones se citan las medidas mínimas y máximas. En el caso de los tricomas se midió el largo de estas estructuras epidérmicas y para los estomas de midió la longitud y latitud (^{Colares & Arambarri, 2008}).

La densidad estomática se calculó según la fórmula de (Salisbury, 1927 mencionado en ^{Colares & Arambarri, 2008 . p. 570}).

Para la densidad de los tricomas se contaron el número de los mismos en 1 mm².

Resultados

Las láminas foliares de las especies tuvieron una consistencia membranosa, excepto Gouania obamana que fue coriácea. Todas presentan un patrón primario de venación de tipo pinnado. La venación de segunda categoría fue craspedódroma cuando las venas secundarias terminan en el margen (^{Hickey & Wolfe, 1975}) como en G. conzattii, G. euricarpa, Gouania lupuloides y G. stipularis. Venación semicraspedódroma cuando las venas secundarias se ramifican muy cerca del margen, una de las ramas termina en el margen, la otra se une a la secundaria superadyacente (Hicken y Wolfe) como es el caso de G. rosei. Venación eucamptódromo-broquidódroma cuando las venas secundarias basales libres llegan al margen y las superiores forman arcos ^{Gomes Bezerra, Soares Silva, & Gomes, (2011}) como en G. guiengolensis, G. obomana, G. polygama, G. pubidisca y G. velutina (Fig. 1).

Fig. 1 Patrones de venación que se observaron en Gouania. 

Las venas secundarias variaron de cuatro a siete, en algunas especies se presentó la misma cantidad de venas en ambos lados de la lámina foliar como en Gouania conzatti, G. eurycarpa, G. lupuloides, G. rosei, G. stipularis y G. velutina. En otras fue diferente el número de venas del lado izquierdo y derecho como en G. guiengolensis, G. obamana, G. polygama y G. pubidisca. En la mayoría de las especies se encontraron estomas anomocíticos, excepto en Gouania eurycapa que son ciclocíticos y en G. obamana que son anomotetracíticos (^{Dilcher, 1974}). El patrón de venación en las muestras observadas no varió en los diferentes especímenes de la misma especie.

La forma de la lámina foliar varió según el taxón, así como el ápice y base, en el margen se encontraron los tipos serrulado a entero en Gouania lupuloides; serrulado o crenado en Gouania conzattii y G. rosei; crenulado en G. pubidisca y margen serrado, serrulado, crenado, crenulado a entero en G. eurycarpa, G. obamana, G. guiengolensis, G. polygama, G. stipularis y G. velutina.

En los taxones se encontraron glándulas marginales excepto en Gouania lupuloides y en G. pubidisca. En G. guiengolensis y G. obamana estas estructuras son pequeñas menores de 1 mm, en las otras especies son mayores a 1 mm. En G. eurycarpa se presentan solo en los primeros tres pares de dientes basales del margen y en el resto de las especies a lo largo del margen; en G. rosei y G. stipularis son prominentes semejando una cúpula.

Las láminas foliares presentaron tricomas unicelulares, la cantidad varió en la misma especie dependiendo del lugar de recolecta, el largo de los tricomas fue de 73 a 464 µm. Los taxones glabros a glabrescentes fueron cuando el promedio de estas estructuras epidérmicas en los tres especímenes en la superficie abaxial, tuvieron una densidad tricomática de 0 a menos de 20 tricomas por mm² como sucede con Gouania obamana y el resto de los taxones son pubescentes con 20 o más por mm²; a su vez, se consideró pubescencia esparcida con más de 20 hasta 50 pelos por mm² y densa de más de 50 por mm².

Los tipos de estomas que se encontraron fueron ciclocíticos como en Gouania eurycarpa, los anomotetracíticos en G. obamana, en las restantes ocho especies, fueron anomocíticos. En la mayoría de las especies los estomas se encontraron en ambas superficies excepto en G. conzattii que se presentaron solo en la abaxial. La densidad estomática varió en los ejemplares observados en una misma especie como puede apreciarse en las descripciones.

Con la información obtenida se presenta una clave para diferenciar las especies y descripciones de cada una de ellas.

Descripciones exomorfológicas, patrón de venación y caracteres de la anatomía foliar de las especies mexicanas del género Gouania.

Gouania conzattii Greenm. (Figs. 2 A , -F)

Fig. 2 Gouania conzattii Greenm. A, hoja con glándulas marginales, peciolo, arquitectura foliar con venas de primera, segunda y tercera categoría, venación craspedódroma; B, detalle de las venas de segunda y tercera categoría opuesto-percurrentes y las de cuarta reticuladas; C, diente del margen con glándula y tricomas; D, detalle de tricomas unicelulares; E, detalle de una glándula; F, estomas anomociticos.  

Hojas simples, simétricas, elípticas a ovadas de 5.7 a 12 cm de largo y 4.1 a 8 cm de ancho, ápice agudo a corto acuminado, base subcordada a truncada, lámina foliar membranosa, margen crenado a crenulado con glándulas en la mayoría de los dientes redondeados (Figs. 2 A, C, E). Peciolo de 0.9 a 4 cm de largo y 2 mm de diámetro. Venación craspedódroma, venas de segunda categoría siete de cada lado de la lámina foliar, el par inferior ramificándose y el resto bifurcadas o simples, nervaduras intersecundarias o de tercera categoría opuesto-percurrentes, las de cuarta reticuladas (Figs. 2 A, B, C). Tricomas unicelulares de 73 a 153 µm y de 26 a 40 por mm² y de 129 a 177 µm y de 28 a 150 por mm² esparcidos a densos en la adaxial y abaxial respectivamente (Fig. 2 D), Estomas anomocíticos (Fig. 2F) en la superficie abaxial de 22.4 a 44.8 µm de longitud y 19.2 a 32 µm de latitud, con una densidad estomática de 3 a 11 por mm².

Goaunia eurycarpa Standl. (Figs. 3, A-E).

Fig. 3 Gouania eurycarpa Standl. A, hoja con glándulas marginales solo en los tres dientes basales, peciolo, arquitectura foliar con venas de primera y segunda categoría, venación craspedódroma; B, venas de segunda, tercera categoría alterno-percurrente y las de cuarta reticuladas; C, tricomas unicelulares; D, detalle del diente con glándula; E, estoma ciclocítico de la superficie abaxial. 

Hojas simples, simétricas, elípticas, a veces ovadas de 5 a 10.5 cm de largo y 2.5 a 6.7 cm de ancho, ápice agudo a acuminado, base subcordada a redondeada, lámina foliar membranosa, margen serrado a serrulado con glándulas en el ápice de cada diente y solo en los tres primeros dientes basales (Figs. 3 A, D). Peciolo de 4 a 13 mm de largo y 1.5 a 2 mm de diámetro, glabrescente. Venación craspedódroma, con cinco venas secundarias de cada lado de la lámina foliar, no ramificadas, nervaduras de tercera categoría alterno-percurrentes, la de cuarta categoría reticuladas (Figs. 3 A, B). Tricomas unicelulares de 125 a 323 µm de largo y de 4 a 40 tricomas por mm² y de 196 a 253 µm de largo y de 28 a 30 por mm², glabrescentes a esparcidos en la adaxial y abaxial respectivamente (Fig. 3C). Estomas ciclocíticos (Fig. 3E), en la adaxial de presentarse de 16 a 25 µm de longitud y 12 a 17.6 µm de latitud, con densidad estomática de 2 a 3 estomas por mm², en la superficie abaxial los estomas son de 19.2 a 27.7 µm de longitud y 12 a 17.6 µm de latitud con densidad estomática de 5 a 7 estomas por mm².

Gouania guiengolensis A. Pool. (Figs. 4, A-E)

Fig. 4 Gouania guiengolensis A. Pool. A, hoja con pequeñas glándulas marginales, peciolo, arquitectura foliar con venas de primera y segunda categoría, venación eucamptódroma-broquidódroma; B, detalle de venas de segunda, tercera categoría alterno-percurrentes y las de cuarta reticuladas; C, tricomas unicelulares; D, detalle de una crenación del margen foliar con glándula; E, estomas anomocíticos. 

Hojas simples, simétricas, lanceoladas a ovadas de 4.5 a 10 cm de largo y 2.5 a 4.7 cm de ancho, ápice agudo o acuminado, base cordada a veces algo decurrente o truncada, lámina foliar membranosa, margen serrado o crenado con glándulas menores de 1 mm (Figs. 4 A, D). Peciolo de 7 a 20 mm de largo y 1 mm de diámetro, pubescente. Venación eucamptódromo-broquidódroma, venas de segunda categoría seis de lado izquierdo y cinco de lado derecho de la lámina foliar, los dos primeros pares inferiores basales ramificadas, el resto de las venas secundarias hasta el ápice forman arcos, las de tercera categoría alterno-percurrentes, y las de cuarta reticuladas (Figs. 4 A, B). Tricomas unicelulares de 223 a 261 µm de largo y de 10 a 47 por mm² y de 216 a 254 µm de largo y de 20 a 70 por mm², glabrescentes, esparcidos a densos en la adaxial y abaxial respectivamente (Fig. 4C). Estomas anomocíticos (Fig. 4 E), en la superficie adaxial de encontrarse de 17.6 a 27.2 µm de longitud y de 8 a 9 µm de latitud, con una densidad de 24 a 29 estomas por mm² y en la superficie abaxial son de 24 a 32 µm de longitud y 15.5 a 21 µm de latitud con densidad estomática de 6 a 35 por mm².

Gouania lupuloides (L.) Urban (Figs. 5. A-E)

Fig. 5 Gouania lupuloides (L.) Urban A, hoja eglandular con peciolo, arquitectura foliar con venas de primera, segunda y tercera categoría, venación craspedódroma; B, detalle del primer par de venas secundarias inferiores mostrando las ramificaciones en forma de arcos. C, detalle de venas de segunda, tercera categoría alterno-percurrente y las de cuarta reticuladas; D, tricomas unicelulares; E, estomas anomocíticos. 

Hojas simples, simétricas, elípticas a ovadas o lanceoladas de 4 a 13 cm de largo y 2 a 8 cm de ancho, ápice acuminado o cuspidado, base redondeada, cordada o corto decurrente, lámina foliar membranosa, margen serrulado, irregularmente serrulado a entero, sin glándulas (Fig. 5 A). Peciolo de 3 a 26 mm y 2 a 3 mm de diámetro, glabrescente. Venación craspedódroma con cinco nervaduras de segunda categoría a cada lado de la lámina foliar, primer par inferior de venas secundarias con ramificaciones que forman pequeños arcos (Fig. 5B), las venas de tercera categoría alterno-percurrentes, la de cuarta categoría reticuladas (Figs. 5 A, C). Tricomas unicelulares de 202 a 297 µm de largo y 8 a 60 tricomas por mm² y de 227 a 278 µm de largo y 10 a 85 por mm² en la adaxial y abaxial respectivamente, glabrescentes a densos (Fig. 5D). Estomas anomocíticos (Fig. 5E), de estar presentes en la adaxial, de 25.6 a 40 µm de longitud y 20.8 a 29 µm de latitud, con densidad estomática 7 a 11 por mm², en la superficie abaxial de 24 a 45 µm de longitud y 19.2 a 29 µm de latitud con densidad estomática de 5 a 12 estomas por mm².

Gouania obamana A. Pool (Figs. 6. A-E)

Hojas simples, simétricas, ovadas a elípticas de 4 a 13 cm de largo y 2.3 a 8 cm de ancho, ápice agudo, redondeado a acuminado, base redonda a obtusa a corto decurrente, lámina foliar coriácea, margen crenulado a entero con glándulas menores de 1 mm en todo el margen (Figs. 6 A, D). Peciolo de 7 a 25 mm de largo y 1 mm de diámetro, glabro. Venación eucamptódromo-broquidódroma, con cuatro venas de lado izquierdo y cinco del derecho, primer par inferior ramificado y las venas que corren hacia el ápice forman arcos, las de tercera categoría alterno-percurrentes, las de cuarta reticuladas (Figs. 6 A, B). Tricomas unicelulares de 175 a 297 µm de largo y 0 a 6 tricomas por mm² y de 198 a 286 µm de largo y de 4 a 8 tricomas por mm², en la adaxial y abaxial respectivamente, glabras a glabrescentes (Fig. 6C). Estomas anomotetracíticos (Fig. 6E), de presentarse en la abaxial de 35 a 37 µm de longitud y 20.8 a 22.5 µm de latitud, con densidad estomática de 4 a 6 por mm² y en la abaxial de 25.6 a 38.4 µm de longitud y 17.6 a 22.5 µm de latitud con densidad estomática de 4 a 8 por mm².

Fig. 6 Gouania obamana A. Pool, A, hoja con glándulas marginales pequeñas, peciolo, arquitectura foliar con venas de primera, segunda y tercera categoría, venación eucamptódromo-broquidódroma; B, detalle de la venación de segunda, tercera alterno-percurrente y las de cuarta reticuladas; C, tricoma unicelular, escaso; D, glándula del margen; E, estomas anomotetracíticos. 

Gouania polygama (Jacq.) Urb. (Figs. 7, A-F).

Hojas simples, simétricas, elípticas, ovadas u oblanceoladas de 4 a 11 cm de largo y 2 a 7 cm de ancho, ápice acuminado a agudo o cuspidado, base cordada a redondeada o corto decurrente, lámina foliar membranosa, margen serrulado o serrado con glándulas en el ápice de cada diente (Figs. 7 A, B, E). Peciolo de 4 a 15 mm de largo y 2 a 3 mm de diámetro, pubescente. Venación eucamptódromo-broquidódroma, la mitad derecha de la lámina foliar con seis venas secundarias y la mitad izquierda con cinco, los primeros tres pares basales con venas libres ramificadas o bifurcadas, las superiores forman los arcos, las de tercera categoría alterno-percurrentes, las de cuarta reticuladas (Figs. 7 A, B, C). Tricomas unicelulares de 158 a 294 µm de largo y 25 a 81 por mm² y de 206 a 244 µm de largo y 21 a 53 por mm², en la adaxial y abaxial respectivamente, esparcidos a densos (Fig. 7D). Estomas anomocíticos (Fig.7 F), sí presentes en la superficie adaxial de 25.6 a 33.6 µm de longitud y 16 a 24 µm de latitud, densidad estomática de 3 a 5 por mm², superficie abaxial de 24 a 27 µm de longitud y 16 a 19 µm de latitud, densidad estomática de 2 a 20 por mm².

Fig. 7 Gouania polygama (Jacq.) Urb. A, hoja con glándulas marginales, peciolo, arquitectura foliar con venas de primera, segunda y tercera categoría, venación eucamptódroma-broquidódroma; B, detalle de las venas de segunda, tercera categoría alterno-percurrentes y las de cuarta reticuladas; C, venas de segunda y tercera categoría y tricomas; D, detalle de tricomas unicelulares; E, diente del margen con glándula; F, estomas anomocíticos. 

Gouania pubidisca A. Pool (Figs. 8, A-D).

Fig. 8 Gouania pubidisca A. Pool A, hoja eglandular con peciolo, arquitectura foliar con venas de primera y segunda y tercera categoría, venación eucamptódromo-broquidódroma; B, detalle de las venas de segunda, de tercera categoría alterno-percurrentes y las de cuarta retiuladas; C, tricomas unicelulares; D, estomas anomocíticos. 

Hojas simples, simétricas, ovadas o elípticas de 4.5 a 10 cm de largo y 3 a 8 cm de ancho, ápice agudo-apiculado u obtuso-apiculado, base cordada, subcordada o redondeada, lámina foliar membranosa, margen crenado sin glándulas (Fig. 8A). Peciolo de 5 a 20 mm y 2 mm de diámetro, glabrescente. Venación eucamptódromo-broquidódroma, venas de segunda categoría dispuestas seis de lado izquierdo y cinco de lado derecho, primer par ramificado, el segundo bifurcado y las siguientes formando arcos, las de tercera categoría alterno-percurrentes, las de cuarta reticuladas (Fig. 8 A, B). Tricomas unicelulares de 207 a 312 µm de largo y 29 a 175 por mm² y de 138 a 367 µm de largo y 17 a 132 por mm² en la adaxial y abaxial respectivamente, glabrescentes, esparcidos a densos (Fig. 8, C). Estomas anomocíticos, los de la superficie adaxial de 24 a 32 µm de longitud y 22.4 a 24 µm de latitud con densidad estomática de 19 a 90 por mm², la abaxial con estomas de 24 a 32 µm de longitud y 21 a 29 µm de latitud con densidad estomática de 5 a 75 por mm² (Fig. 8D).

Gouania rosei Wiggins (Figs. 9, A-E).

Hojas simples, simétricas, elípticas, oblongas a ovadas de 4.2 a 13 cm de largo y 2 a 8 cm de ancho, ápice agudo a acuminado, base cordada, subcordada o redondeada, lámina foliar membranosa, margen crenado o crenulado con glándulas sobresaliendo en forma de cúpula en cada diente redondeado. (Figs. 9 A, D). Peciolo de 5 a 20 mm de largo y 2 mm de diámetro, pubescente. Venación semicraspedódroma, venas de segunda categoría cuatro de cada lado de la lámina foliar y el primer par inferior ramificado, nervaduras de tercera categoría alterno- percurrentes, las de cuarta reticuladas (Figs. A, B). Tricomas unicelulares de 109 a 287 µm de largo y 41 a 83 por mm² y de 155 a 336 µm de largo y 41 a 81 por mm², en la adaxial y abaxial respectivamente, esparcidos a densos (Fig. 9 C). Estomas anomocíticos (Fig. 9E), superficie abaxial de 25.6 a 32 µm de longitud y 18 a 24 µm de latitud, densidad estomática de 7 a 11 por mm², superficie abaxial de 24 a 40 µm de longitud y 19 a 27 µm de latitud, densidad estomática de 19 a 32 por mm².

Fig. 9 Gouania rosei Wiggins A, hoja con glándulas marginales prominentes como cúpulas, peciolo, arquitectura foliar con venas de primera, segunda y tercera categoría, con venación semicraspedódroma; B, detalle de las venas de primera, segunda y tercera alterno-percurrentes y las de cuarta reticuladas; C, tricomas unicelulares; D, glándula prominente como cúpula; E, estomas anomocíticos. 

Gouania stipularis DC. (Figs. 10, A-F)

Fig. 10 Gouania stipularis DC. A, hoja con glándulas marginales prominentes como cúpulas, peciolo, arquitectura foliar con venas de primera, segunda y tercera categoría, venación craspedódroma; B, detalle de venas de segunda, tercera categoría alterno-percurrentes y las de cuarta reticuladas; C, venas de primera, segunda y tercera categorías con pubescencia, D, tricomas unicelulares; E, glándula prominente como una cúpula en un diente; F, estomas anomocíticos. 

Hojas simples simétricas, elípticas, de 7 a 15 cm de largo y 3 a 8.5 cm de ancho, ápice acuminado, lámina foliar membranosa, margen serrado, crenado o crenulado con glándulas en cada diente semejando una cúpula (Figs. 10 A, E). Peciolo de 10 a 30 mm de largo y 2 mm de ancho, glabro, Venación craspedódroma, con cinco venas de segunda categoría, el par inferior ramificado, las de tercera categoría opuesto-percurrentes, las de cuarta reticuladas (Figs. 10 A, B, C). Tricomas unicelulares de 303 a 464 µm de largo y 2 a 4 mm² y de 115 a 299 µm y 42 a 67 por mm², en la cara adaxial y abaxial respectivamente, glabrescentes, esparcidos a densos (Fig. 10 D). Estomas anomocíticos (Fig. 10F), en la adaxial sí presentes de 22.4 a 25.6 µm de longitud y 17.6 a 19.2 µm de latitud con densidad estomática de 2 a 6 por mm², superficie abaxial de 30.5 a 38.5 µm de longitud y 17.6 a 32 de latitud con densidad estomática de 3 a 5 por mm².

Gouania velutina Reissek (Figs. 11, A-E)

Fig. 11 Gouania velutina Reissek A, hoja con glándulas marginales, arquitectura foliar con venas de primera, segunda y tercera categoría, venación eucamptódroma-broquidódroma; B, detalle de las venas de segunda, tercera categoría alterno-percurrente y las de cuarta reticuladas; C, tricomas unicelulares; D, estructuras glandulares en cada crenación; E, estomas anomocíticos. 

Hojas simples, simétricas elípticas a anchamente elípticas de 4 a 10.5 cm de largo y 3 a 8 cm de ancho, ápice obtuso apiculado a redondo apiculado a corto acuminado, base cordada a subcordada, lámina foliar membranosa, margen crenado o crenulado con glándulas en cada diente redondeado (Figs. 11 A, D). Peciolo de 4 a 10 mm de largo y 2 mm de diámetro, pubescente. Venación eucamptódromo-broquidódroma, venas de segundo orden, seis de cada lado de la lámina foliar, primeros tres pares basales ramificados y las restantes formando arcos, nervaduras de tercera categoría alterno-percurrente, las de cuarta reticuladas (Figs. 11 A, B). Tricomas unicelulares de 272 µm de largo y 52 tricomas por mm² y de 308 µm de largo y 78 por mm² en la adaxial y abaxial respectivamente, densos (Fig.11 C). Estomas anomocíticos en ambas superficies, la adaxial de 32 µm de longitud y 25.6 µm de latitud con densidad estomática de 24 por mm², superficie abaxial con estomas de 32 µm de longitud y 19.2 µm de latitud con densidad estomática de 25 por mm² (Fig. 11 E).

Discusión

Al comparar los datos de la familia Rhamnaceae relacionados con la anatomía y arquitectura foliar se encontró que ^{Meyer & Meola (1978)}, estudiaron caracteres morfológicos de hoja y tallo de algunas plantas leñosas de Texas, entre ellas Colubrina texensis (Torr. & Gray) Gray, Condalia obtusifolia (Hook.) Weberb. y Karwinskia humboldtiana (Schult.) Zucc. Encontraron como carácter común en estos géneros la ausencia de estomas en la superficie adaxial y en la superficie abaxial la densidad estomática fue de 369, 296 a 589 por mm² respectivamente, la longitud de los estomas de 18, 20 a 14 µm con estomas ranunculáceos, que según (^{Azcárraga, Bonfil, Ríos, & Sandoval (2010, p. 47)} corresponden a los anomocíticos. Al comparar los datos anteriores con los de Gouania, difieren en que, nueve especies son anfiestomáticas y solo G. conzattii los presentan en la superficie abaxial; la densidad estomática es mucho menor, los taxones que presentan la mayor densidad son G. guiengolensis donde el promedio de los tres especímenes es de 50 por mm² y en G. pubidisca de 37 por mm², el tamaño de los estomas oscilan entre 14 a 28 µm en las especies. Seguramente estas diferencias se deban a que son diferentes géneros y condiciones ambientales donde prosperan. Tienen en común, que ocho especies de Gouania presentan estomas de tipo anomocíticos al igual que los géneros citados por ^{Meyer & Meola (1978)}.

^{Schirarend (1991)} estudió la anatomía de la madera las Rhamnaceae de la Tribu Zizipheae, a la cual no pertenece Gouania y se hacen un par de menciones al tallo trepador de este género como una estrategia evolutiva.

^{Colares & Arambarri (2008)} estudiaron la morfo-anatomía y arquitectura foliar de Ziziphus mistol y así pudieron caracterizar esta especie contribuyendo a la micro y macroidentificación del taxón, destacan el tipo de venación acródroma basal perfecta (con tres venas primarias y de ahí se constituyen las secundarias). El género que investigaron estos autores pertenece a una tribu diferente a Gouania y tienen en común el tipo de estomas anomócitos como predominantes, aunque Ziziphus también muestra estomas paracíticos y Gouania además presenta ciclocíticos y anomotetracíticos.

^{Shisode & Patil (2011)} estudiaron la anatomía del peciolo de una especie de los géneros Colubrina, Gouania, Pomaderris, Rhamnus, dos de Ventilago y seis de Ziziphus, los autores mencionan que la anatomía del peciolo es útil para diferenciar los taxones. Se incluye a Gouania microcarpa DC., que destaca por presentar un contorno circular con un canal poco profundo adaxialmente y cavidades secretoras en la región cortical. No se menciona el tamaño de los peciolos, pero en el caso de las especies de Gouania presentes en México, las hojas son pecioladas y el largo varía de 4 a 30 mm de largo y de 1 a 3 mm de diámetro, pubescente o glabro.

A partir de la arquitectura foliar de las especies estudiadas se encontraron tres grandes grupos: Venación craspedódroma: Gouguania conzattii, G. euryocarpa, G. lupuloides y G. stipularis. Venación eucamptódromo-broquidódroma: G. guiengolensis, G. obamana, G. polygama, G. pubidisca y G. velutina. Venación semicraspedódroma: G. rosei. Estas diferencias además de ayudar en la separación taxonómica pueden indicar relaciones entre grupos de taxones lo cual complementaría la revisión realizada por ^{Pool (2014a)}. En cuanto a la parte anatómica se encontraron tres tipos de estomas, los anomocíticos que son los que prevalecen, los ciclocíticos en G. eurycarpa y los anomotetracíticos en G. obamana que serían características adicionales distintivas.

^{Pool (2014a)} refiere que en el estado de Chiapas puede presentarse hibridación entre Gouania lupuloides y G. polygama y ser confundidas con G. conzattii. Estos taxones tiene en común seis o siete pares de venas laterales, además de otros caracteres de la flor (^{Pool, 2014, p. 509}). Estas tres especies se pueden separar por los rasgos de patrones de venación y anatómicos debido a que G. lupuloides tiene venación craspedódroma con cinco nervaduras y ausencia de glándulas en el margen, G. polygama con venación eucamptódromo-broquidódroma, glándulas en el margen, seis venas secundarias del lado derecho y cinco del lado izquierdo de la lámina foliar y G. conzattii aunque tiene venación craspedódroma al igual que G. lupuloides, presenta estructuras glandulares en el margen y siete venas secundarias en la lámina foliar.

Se considera que G. eurycarpa es difícil de separar de G. lupuloides (^{Pool, 2014, p 513}), sin embargo, al comparar los caracteres que se obtuvieron de ambas especies, tienen en común la venación craspedódroma y cinco venas secundarias a cada lado de la lámina foliar, aunque G. eurycarpa presenta glándulas en el margen, estomas ciclocíticos y el primer par de venas secundarias no está ramificado, en cambio G. lupuloides no presenta glándulas en el margen y el primer par de venas secundarias basales se ramifica formando arcos y los estomas son anomocíticos.

Gouania guiengolensis y G. rosei son muy afines y se distribuyen en la zona del Océano Pacifico desde Baja California y Sonora a Tehuantepec, Oaxaca, presentan estípulas sin lóbulos y la superficie abaxial de las hojas vellosas a pilosas (^{Pool, 2014 p. 518}). Ambas especies pueden diferenciarse por caracteres de arquitectura foliar y anatómicos debido a que G. guiengolensis presenta venación eucamptódromo-broquidódroma con glándulas muy pequeñas en el margen, seis venas secundarias del lado izquierdo de la lámina foliar y cinco del derecho, mientras que en G. rosei la venación es semicraspedódroma con cuatro pares de venas secundarias a cada lado de la lámina foliar y las glándulas del margen son prominentes como una cúpula. También se menciona que varios ejemplares de G. guiengolensis fueron identificados como G. lupuloides (^{Pool, 2014a, p. 518),} sin embargo a partir de este estudio, la primera especie tiene venación eucamptódromo-broquidódroma con glándulas pequeñas en el margen y la segunda con venación craspedódroma y sin glándulas.

Gouania obamana se considera una especie afín a G. polygama (^{Pool, 2014a, p. 526}), sin embargo, a partir de los caracteres de patrones de venación y anatomía foliar fácilmente se separan, la primera tiene glándulas menores de 1 mm en el margen, cuatro venas secundarias del lado izquierdo de la lámina foliar y cinco del derecho, lámina coriácea, glabrescente y estomas anomotetraciticos, mientras G. polygama tiene glándulas marginales mayores de 1 mm, laminas foliares con seis venas del lado derecho y cinco del izquierdo, lámina membranosa, pilosa, estomas anomociticos y ambas especies tienen en común la venación eucamptódromo-broquidódroma.

^{Pool (2014a)} mencionó que ^{Acevedo-Rodríguez (2003)} separó Gouania polygama de G. lupuloides por la densidad de los tricomas en las hojas, la primera tiene un rango de pubescencia en la superficie abaxial desde densa a esparcida y en G. lupuloides la pubescencia en la abaxial es más bien esparcida o bien se restringe solo a las venas (^{Pool, , 2014a, p. 530}). En este trabajo se encontró que los tricomas en la superficie abaxial en G. lupuloides fueron de glabrescentes a esparcidos y en G. polygama son de esparcidos a densos, de tal manera, que por la pubescencia no es posible separar estos taxones. En términos generales, por las observaciones realizadas en este estudio, la cantidad de tricomas en las superficies de las hojas no es un buen carácter para separar taxones, en cambio la arquitectura y anatomía foliar aportan elementos para diferenciar las especies, así Gouania lupuloides se diferencia por la venación craspedódroma con el primer par inferior de venas de segunda categoría con ramificaciones que forman arcos y la ausencia de glándulas en el margen y G. polygama la venación es eucamptódroma-broquidódroma, con el par inferir de venas ramificadas no formando arcos, con estructuras secretoras en el margen.

Con frecuencia el nombre de Gouania polygama ha sido mal aplicado a especies como G. conzattii, G. guiengolensis, G. pubidisca, G. rosei y G. velutina por las hojas pubescentes (^{Pool, 2014a, p. 533}). En este trabajo se encontró que las especies antes citadas presentan tricomas de esparcidos a densos según la localidad de recolecta, por lo que no se recomienda este carácter para la separación de taxones. Las especies antes referidas se diferencian por el tipo de venación, Gouania conzattii con venación craspedódroma y siete venas secundarias en la lámina foliar, glándulas marginales presentes no sobresalientes. G. rosei venación semicraspedódroma, venas secundarias cuatro de cada lado y glándulas marginales prominentes semejando una cúpula. En el resto de los taxones la venación es eucamptódromo-broquidódroma, G. pubidisca no presenta glándulas marginales, seis venas laterales del lado izquierdo y cinco del derecho de la lámina foliar. Las demás especies presentan glándulas marginales, G. velutina con seis venas secundarias a cada lado de la lámina foliar, G. guiengolensis con seis venas secundarias izquierdas y cinco derechas, glándulas menores de 1 mm y G. polygama con seis venas derechas y cinco izquierdas de la lámina foliar, glándulas mayores a 1 mm.

^{Pool (2014a)} sugiere que G. pubidisca es afín a G. rosei (^{Pool, 2014a, p. 537}), sin embargo, la arquitectura y la anatomía foliar es muy diferente, la primera tiene venación eucamptódromo-broquidódroma, sin glándulas en el margen y con seis venas secundarias del lado izquierdo y cinco al derecho de la lámina foliar y G. rosei con venación semicraspedódroma, glándulas prominentes a manera de cúpula y con cuatro venas secundarias a cada lado de la lámina foliar.

Gouania rosei fácilmente se reconoce por el tipo de fruto, pero G. lupuloides, G. conzattii y G. polygama que tienen una distribución geográfica que se sobrepone con G. rosei pueden ser confundidas cuando el fruto está ausente (^{Pool, 2014a, p. 539}). En consideración a lo anterior, pueden reconocerse por la venación semicraspedódroma y las glándulas prominentes en forma de cúpula en G. rosei; la venación craspedódroma, ausencia de glándulas, cinco nervaduras secundarias en la lámina foliar en G. lupuloides; este mismo tipo de venación con glándulas y siete nervaduras secundarias en G. conzattii y venación eucamptódromo-broquidódroma y glándulas marginales en G. polygama.

Gouania stipularis se reconoce fácilmente por las estipulas trilobadas con un lóbulo lateral largo y foliáceo, sin embargo, algunos especímenes de G. lupuloides presentan estípulas bilabiadas y en ocasiones pueden tener un lóbulo largo foliáceo y además algunos especímenes de G. stipularis pueden perderlas y entonces se dificulta separarla de G. lupuloides (^{Pool, 2014a, p. 541}). En cuanto a la arquitectura foliar, ambas especies presentan venación craspedódroma, G. stipularis tiene glándulas prominentes en forma de cúpulas en el margen de la hoja, cinco nervaduras secundarias por lado en la lámina foliar, el par inferior de venas secundarias ramificado, mientras que G. lupuloides no presenta glándulas en el margen, también presenta cinco nervaduras secundarias por lado en la lámina foliar y el primer par de venas de segunda categoría las ramificaciones forman arcos.

Algunos especímenes de Gouania velutina han sido erróneamente identificadas por su exomorfología como G. polygama o G. eurycarpa en el trabajo de Krings y Braham (2005) según lo cita (^{Pool, 2014a, p. 543}). Al considerar la arquitectura y la anatomía foliar estos tres taxones pueden separarse ya que G. velutina y G. polygama presentan venación eucamptódromo-broquidódroma y estomas anomocíticos, la primera especie con seis venas a cada lado de la lámina foliar y G. polygama con seis venas secundarias del lado derecho y cinco venas del lado izquierdo y en G. eurycarpa el patrón de venación es craspedódroma con cinco venas secundarias por lado de la lámina foliar y estomas ciclocíticos.

La morfología del fruto de Gouania guiengolensis y G. polygama tienen en común presentarlos glabros o con pocos tricomas y en algunas colecciones se han confundido estas dos especies (^{Pool, 2014, p. 518}). Estas dos especies son las que presentan más afinidad en la arquitectura y anatomía foliar, ambos tienen el mismo tipo de venación, sin embargo, la primera especie presenta seis nervaduras secundarias del lado izquierdo y cinco del derecho de la lámina foliar, con glándulas menores de 1 mm y la segunda con seis nervaduras del lado derecho y cinco del izquierdo de la lámina foliar, glándulas del margen mayores de 1 mm.

Conclusiones

Se encontraron tres grupos de especies en relación a la venación de la lámina foliar, la craspedódroma, eucamptódromo-broquidódroma y semicraspedódroma Estas diferencias además de ayudar en la separación taxonómica pueden indicar relaciones entre grupos de taxones que pueden marcar relaciones entre los mismos.

Los principales caracteres que apoyaron la separación de las especies es el tipo de arquitectura foliar; ausencia o presencia de glándulas en el margen, tamaño y si son prominentes o no; número de venas en la lámina foliar y si el primer par de venas basales secundarias se ramifican o no.

Algunos caracteres que se utilizaron como información complementaria en la separación de las especies fue el tipo de margen de la lámina, la pubescencia como glabra a glabrescente, esparcida y densa así como las variaciones en las formas de las láminas foliares y los tipos de estomas anomocíticos, anomotetracíticos y ciclocíticos.

En cuanto a la anatomía foliar se tomaron en consideración los tres tipos diferentes de estomas. La densidad estomática y el tamaño de los mismos no aportaron diferencias para la separación de las especies.

Con base en los caracteres de arquitectura y anatomía foliar fue posible distinguir las especies del género Gouania que prosperan en México.