Introducción

El género Dalbergia es un grupo de plantas tropicales distribuidas en todo el mundo y éste tiene 159 especies descritas (ILDIS: International Legume Database and Information Service). En México se conocen 27 especies de este género ^{(Linares y Sousa 2007)}, entre las cuales Dalbergia congestiflora Pittier presenta mayor importancia debido que a que su madera se utiliza para la elaboración de instrumentos musicales en el Estado de Michoacán ^{(Guridi Gómez 1996)}. Aunque dicha especie es de interés comercial, no existe información sobre su propagación sexual, ni sobre su propagación por otros métodos.

La propagación asexual es una alternativa en los casos difíciles de propagación sexual y ésta se usa en muchas especies arbóreas forestales. Existen varios mecanismos de propagación asexual, pero la micropropagación y la propagación por estaca son las más utilizadas. En el caso de la micropropagación se ha usado en Dalbergia latifolia Roxb. ^{(Swamy et al. 1992)}, en D. retusa Hemsl ^{(Valverde Cerdas y Alvarado Guzmán 2004)} y en D. sissoo Roxb. ^{(Singh et al. 2002)}. Mientras que la propagación por estaca se utilizó para D. sericea G.Don, D. sissoo DC. y D. melanoxylon Guill. & Perr. ^{(Uniyal et al. 1993)}.

El porcentaje de enraizamiento de estacas varía en función de la concentración de hormonas, el tejido de la estaca y de la especie. El porcentaje de enrizado varía entre 25 y 66 % a 100 ppm de ácido indolbutírico (AIB) ^{(Uniyal et al. 1993}, ^{Puri y Verma 1996}, ^{Singh et al., 2011)} y una reducción del enraizado se reportó con dosis entre 500 y 1000 ppm de la misma auxina ^{(Uniyal et al. 1993}, ^{Puri y Verma 1996)}. En relación a la especie, en enraizado de estacas de D. sericea se reportó entre 3 y 53 % ^{(Uniyal et al. 1993)}, para D. sissoo se reportó un enraizado de 20 y 66 % ^{(Puri y Verma 1996}, ^{Husen 2008}, ^{Singh et al. 2011)} y en D. melanoxylon el enraizado fue de entre 2 y 47 % ^{(Amri et al. 2010)}. Por último, las estacas de la parte media y basal presentan mayor enraizamiento respecto a las estacas de la parte apical ^{(Puri y Verma 1996}, ^{Amri et al. 2010)}.

En las especies de Dalbergia mencionadas anteriormente se nota claramente que en la mayoría de las estacas no se requiere la aplicación de hormonas en dosis superiores a 100 ppm con la auxina AIB y que se obtiene mayor porcentaje de enraizamiento en estacas basales. Por lo que las hipótesis de este trabajo fue: un alto porcentaje de brotación y enraizado se presenta en las estacas basales de Dalbergia congestiflora Pittier a concentraciones bajas de AIB. El objetivo fue determinar el porcentaje de brotación, número de brotes promedio por estaca, longitud promedio de los brotes y el porcentaje de enraizado de estacas de D. congestiflora en estacas de la parte basal, media y apical con la aplicación de auxinas a concentraciones entre 1, 5 y 10 ppm.

Método

Las ramas de Dalbergia congestiflora se colectaron en Carácuaro, Michoacán, México (18° 19´19” norte y 101°18´56” oeste a 548 m.s.n.m.) . La identificación botánica de la especie se realizó en el Herbario de la Facultad de Biología de la Universidad Michoacana de San Nicolás de Hidalgo. Estas ramas se colectaron de un total de 5 individuos con alturas entre 3 y 5 m, de las cuales se obtuvieron varetas de 1.2 m. Dichas varetas se dividieron en estacas de 20 cm de longitud con 2 y 3 nudos. Todas las estacas presentaron yemas de 1 a 2 mm de longitud de color verde claro y con corteza lisa. Las estacas seleccionadas presentaron diámetro de 0.5, 1.0 y 1.5 cm, denominadas como parte apical, media y basal respectivamente.

Las estacas fueron tratadas con la auxina ácido inodolbutírico (AIB) en concentraciones de 0, 1, 5 y 10 ppm. Dichas concentraciones fueron a partir de tres formulaciones comerciales: auxina (AUX) (ácido indol-3-butírico al 98 %, Sigma Aldrich), auxina-fungicida (AUX-F)(Raizone Plus ® a 600 ppm de AIB y captan a 3,000 ppm) y auxina-nitrógeno-fósforo (AUX-NP) (Pro-Root ® con 200 ppm de AIB, 11% de nitrógeno total y 55% de fósforo aprovechable). Los enraizadore se solubilizaron en un litro de agua potable y las cantidades fueron de 1.02 mg, 5.1 mg y 10.2 mg para el tratamiento AUX, de 1,600 mg, 8,300 mg y 16,600 mg para el tratamiento AUX-F y de 5,000 mg, 25, 000 mg y 50,000 mg para el tratamiento de AUX-NP en el caso de 1, 5 y 10 ppm respectivamente de cada enraizador. El número total de tratamientos fue de 30 al considerar 3 concentraciones, tres tipos de estacas, tres enraizadores y el tratamiento control. El número de reprticiones por tratamiento fue de 3, por lo que el total de estacas fue de 90.

Las estacas fueron sumergidas en la solución enraizadora por 24 h antes de la siembra. En cada tratamiento se utilizaron tres estacas. Posteriormente, las estacas fueron sembradas en macetas de polipropileno de 500 ml de capacidad, conteniendo como sustrato una mezcla sin esterilizar de turba (Premier Peat Moss Sphagnum) y agrolita (Hortiperl-Termolita) en proporción 1:1(v:v). Después de la siembra, cada contenedor fue cubierto con bolsa de polietileno transparente para evitar la pérdida de humedad. Todos los contenedores se mantuvieron en invernadero (Agrosystem) durante 150 días. Las condiciones de luz en el invernadero no fueron controladas y la temperatura varió entre 18 y 28 °C con una humedad relativa promedio de 70 %. Las variables evaluadas fueron el porcentaje de brotación, número de brotes por estaca y longitud de brotes a los 15, 45 y 75 días. El porcentaje de brotación se obtuvo de las estacas con presencia de brotes vivos en relación al total de estacas del tratamiento. El número de brotes promedio y la longitud promedio de brotes se obtuvieron en relación solo a las estacas con presencia de brotes. Un análisis de varianza se realizó para los datos de número de brotes y longitud de brotes. Por último, el porcentaje de enraizamiento de las estacas se evaluó a los 150 días de cultivo y para este parámetro se consideró el número total de estacas que presentaron brotación.

Resultados

El porcentaje de brotación en las estacas de Dalbergia congestiflora(Cuadro 1) presentó un rango entre 11 y 100 % con las diferentes concentraciones (1, 5 y 10 ppm) de ácido indolbutírico (AIB) y en el tejido de la estaca (apical, media y basal), en donde la mayoría de los datos fueron mayores al 50 %. Lo anterior se presentó solo a los 15 días de cultivo, ya que la brotación se redujo en todos los tratamientos después de 45 y 75 días. A nivel de formulación, el porcentaje de brotación fue mayor en los tratamientos en donde se aplicó el AIB a partir de auxina-nitrógeno-fósforo (AUX-NP) y auxina (AUX) en relación los tratamientos con AIB a partir de auxina-fungicida (AUX-F). Mientras que las estacas basales presentaron mayor brotación a los 45 y 75 días.

El número y la longitud de brotes promedio se presentan en el Cuadro 2. En dichos parámetro no se presentó diferencia significativa entre los tratamientos con la concentración de auxina. Por otro lado, el número y longitud de brotes fueeron mayores estadísticamente en las estacas de la parte basal en relación a las estacas de la parte apical. La fuente de auxina AUX-NP presentó diferencia significativa en relación a los otros dos tratamientos (AUX Y AUX-F) en el número de brotes por estaca. Aunado a esto, la cantidad de brotes y su longitud fue mayor a los 45 y 75 días y estos valores fueron mayores estadísticamente comparados con los valores observados a los 15 días.

Discusión

Las estacas de Dalbergia congestiflora formaron brotes con la aplicación de ácido indolbutírico (AIB) a concentraciones de 1, 5 y 10 ppm. Estos resultados son los primeros reportes de propagación por estaca de la especie. La brotación en otras especies de Dalbergia se reportó a dosis de auxina exógena superiores a 100 ppm ^{(Husen 2004)}. Lo anterior indica que las yemas axilares de las estacas de D. congestiflora contenían una concentración de auxina endógena muy cercana a la concentración adecuada, por ello éstas necesitaron de menor cantidad de auxina exógena por proceder de árboles donadores maduros botánicamente, lo cual coincide con reportes previos para la especie de Tectona grandis Linn. f. ^{(Husen y Pal 2006)}.

La brotación varió entre 11 y 100 %, lo cual se ubica en el rango reportado para diferentes especies del género Dalbergia. Al final del experimento, el porcentaje de brotación se mantuvo mayoritariamente en las estacas basales, lo cual difiere de los resultados reportados para D. sisso^{(Husen 2004}, ^{Husen y Pal 2007)}, ya que dichos autores reportaron mayor brotación en las estacas de la parte media. Además, la brotación disminuyó a través del tiempo, quedando entre 2 y 24 % después de 75 días. Por lo tanto, la disminución del porcentaje de brotación en este experimento se debió a la ausencia de raíces a partir de los primeros días en todas las concentraciones aplicadas de AIB y a los diferentes tejidos de la estaca.

El número de brotes promedio en estacas de D. congestiflora fue de entre 1.9 y 4.9. Este rango coincide con el rango reportado en estudios anteriores ^{(Puri y Swamy 1999}, ^{Husen y Pal 2006)}. Tanto en número de brotes como la longitud del brote presentaron valores mayores en las estacas de la parte basal. Mientras que a nivel de fuente de auxina y concentración de auxina se observó una diferencia significativa solo en la fuente AUX-NP en relación a las otras fuentes para la variable número de brotes por estaca.

El enraizado de las estacas se observó únicamente en la parte basal a 10 ppm de AIB en el tratamiento AUX-F. Mayor enraizado en estacas basales ^{(Puri y Verma 1996}, ^{Amri et al. 2010)} y medias ^{(Husen 2004)} se observó previamente en especies de Dalbergia. ^{Husen (2008)} observó una cantidad mayor de carbohidratos en la parte basal de las ramas y debido a esto se enconró también mayor cantidad de carbohidratos hidrolizados por la presencia del AIB. Por lo que el enraizamiento solo en la parte basal a 10 ppm de AIB podría ser también resultado de una cantidad mayor de carbohidratos almacenados en la parte basal y mayor cantidad de carbohidratos hidrolizados a la mayor concentración de AIB utilizada.

Las estacas de D. congestiflora presentaron un porcentaje alto de brotación y un porcentaje bajo de enraizado con la aplicación de AIB a concentraciones menores a 10 ppm. Esta situación se presentó también en otras especies de Dalbergia^{(Uniyal et al. 1993)} y los autores propusieron que se debe a un desgaste de los carbohidratos y por ello no se presenta el enraizado de las estacas. Por lo tanto, en este experimento se pudo comprobar que entre 1 y 10 ppm de AIB se promueve un alto porcentaje de brotación tanto en estacas apicales, medias y basales de Dalbergia congestiflora y que el porcentaje de enraizado fue del 2.5 % solo en la estacas de la parte basal, con lo cual se acepta parcialmente la hipótesis del trabajo.