Material genético

Se empleó un compuesto de maíz de la raza Elotes Occidentales, obtenido de colectas realizadas en el occidente de México en los estados de Jalisco, Michoacán y Zacatecas. Una muestra de 2 kg del compuesto de la población original (PO), se dividió en tres subgrupos por apreciación visual de la intensidad de color del grano en claros (C), intermedios (I) y oscuros (O).

Ubicación del experimento

El cultivo para fijar el color en grano se estableció en el campo experimental del Centro Universitario de Ciencias Biológicas y Agropecuarias de la Universidad de Guadalajara que se localiza en Zapopan, Jalisco, México. Sus coordenadas geográficas son 20° 43’ latitud norte y - 103° 23’ longitud oeste a una altitud de 1 650 msnm. Con temperatura media anual de 18° C y precipitación de 950 mm. Los suelos son de pH ácido y de textura franco-arenosa. En los ciclos de P/V 2013 en campo abierto bajo condiciones de temporal, en otoño-invierno (O-I) 2013-2014, O-I 2014-2015, primavera-verano (P-V) 2015 y O-I 2016-2017, en invernadero con riego. En el establecimiento del cultivo, no se evalúan los genotipos a través de los ambientes, solo se fijó el color.

Manejo agronómico

El primer ciclo de cultivo se estableció en parcelas de dos surcos a una distancia de 0.75 m entre surcos y 5 m de longitud, sembrando con una densidad de siembra de 45 000 plantas ha^-1. Se aplicó la fórmula 18 46 00 (N-P- K) a una dosis de 200 kg ha^-1 a la siembra, en una primera escarda se aplicó urea con la fórmula 46-00-00 en dosis de 30 kg ha^-1. En los siguientes ciclos de cultivo en invernadero, el manejo fue similar entre ellos. Se establecieron en parcelas de dos surcos de 20 m de longitud y 0.75 m entre surcos, se sembraron 10 semillas de cada familia (familia por mazorca), considerando 20 familias por intensidad de coloración, directamente en suelo a una distancia de 0.20 m entre plantas. Se incorporó el fertilizante en el riego, realizando una aplicación con la fórmula 12-61-00, la segunda aplicación fue con las fórmulas 12-00-46 y 11-00-00-23, una tercera aplicación se hizo con la fórmula 32-04-00. Para el control de plagas, malezas y enfermedades, se monitorearon incidencias y en su caso se aplicó control químico.

Método de obtención de la población final (PF)

De cada ciclo se seleccionaron por apreciación visual 20 familias por intensidad de color C, I y O. La semilla separada se sembró en el ciclo sucesor sin utilizar un diseño. Se realizaron autopolinizaciones los primeros tres ciclos (S₁, S₂ y S₃). En los siguientes dos ciclos, se realizaron cruzas fraternales para obtener grano con intensidad de coloración uniforme por cada subpoblación (C, I y O) de la PF. Se empleó una muestra de 1 kg de grano de cada subpoblación para determinar la calidad del grano en cuanto a características físicas, variables tecnológicas para la elaboración de pozole y propiedades nutracéuticas, comparándolas con subpoblaciones de la PO (Figura 1).

Figura 1 Clasificación de las poblaciones de origen (PO) y final (PF) de acuerdo a la intensidad de coloración.  

Características físicas

Se midió el color con un equipo Hunter-Lab en la escala CIELab, en las modalidades de grano crudo (Gcr) sin procesar y en el grano procesado para pozole que se denotó sólo como grano cocido (Gcd), mismo que se deshidrató en estufa por 24 h a 40 °C. Se obtuvieron los valores de las lecturas de luminosidad (Lum, %), a^* y b^*, a partir de estos dos últimos parámetros se calcularon las variables de ángulo de tono “hue” (h°) e índice de saturación de color “croma”, por medio de las expresiones: h°= arctg (b^*/a^*), croma= (a^*2 + b^*2)^1/2 (^{McGuire, 1992}).

En el Gcr se determinaron las variables: longitud (L), ancho (A) y grosor (G) en una muestra de 10 granos (mm), humedad del grano (HG, %), peso hectolítrico (PH, kg hL^-1), peso de cien granos (PCG, g). La dureza se determinó de manera indirecta por el índice de flotación (IF, %). El espesor de pericarpio (EP, µm) se midió en un bloque de cinco capas de pericarpio de la cara contraria a la ubicación del germen con un micrómetro. Las variables se realizaron por duplicado de acuerdo con lo descrito por Salinas y Vázquez (2006).

Variables tecnológicas para la elaboración de pozole

Se consideraron 100 g de cada una de las muestras por intensidad de color (C, I y O) de ambas poblaciones (PO y PF). Para la elaboración de pozole y las pruebas de nixtamalización y cocción para floreado del grano: sólidos totales en nejayote (STN) y en caldo de cocción (STC) en g 100 g^-1, humedad del grano nixtamalizado (HGN) y cocido (HGC) en g 100 g^-1 por el método de la estufa; tiempo de cocimiento para floreado del grano (TCF) en min; volumen de expansión (VE) en mL y (%) de granos floreados (GF) se realizaron de acuerdo con lo descrito por ^{Bonifacio et al. (2005)}. Para la variable rendimiento de grano a pozole (RGP) se calculó según ^{Vázquez y Santiago (2013)}, y se expresó como kg de producto obtenido por kg de maíz procesado.

Variables nutracéuticas

Obtención del extracto

Para la extracción se utilizó una muestra de 25 granos de cada una de las subpoblaciones de PO y de PF en las modalidades de Gcr y Gcd. En ambos casos el grano se trituró con un martillo y en el caso particular del germen se seccionó en trozos pequeños con ayuda de un bisturí. La muestra se desgrasó con bencina de petróleo por ocho horas en un equipo Soxhlet. Se colocó en estufa a 40 °C para remover el solvente y se molió en un molino tipo ciclónico (UDY, Tecator, City, State) con malla de 0.5 mm. Para la extracción de antocianinas se consideró 1 g de harina, a la que se le añadieron 20 mL de disolvente (metanol acidificado al 1% con ácido trifluoracético, TFA). Las muestras se sonicaron por 15 min, posteriormente se refrigeraron durante 105 min. Se centrifugaron a 10 000 rpm (11200 G) por 9 min en una centrífuga marca Hettich zentrifugen, modelo Universal 32, para recuperar sobrenadante y eliminar turbidez. El extracto se filtró en Whatman Núm. 4 y se midió su volumen. A partir de este extracto se determinó por duplicado el CAT, FST y la CA.

Contenido de antocianinas totales (CAT)

Se leyó la absorbancia del extracto en un espectrofotómetro Perkin Elmer (Lambda 25 UV/Vis) a 520 nm. Se elaboró una curva patrón de pelargonidina clorada (Sigma Aldrich, MN) para expresar el contenido de CAT en función de este compuesto, dado que las antocianinas predominantes en el color de grano analizado son derivados de pelargonidina (^{Salinas et al., 1999}; ^{Paulsmeyer et al., 2017}). Los resultados se expresaron en mg equivalentes de pelargonidina clorada (EPC) en 100 g de muestra seca (MS).

Fenoles solubles totales (FST)

Se utilizó el método de Folin Ciocalteau descrito por ^{Singleton y Rossi (1965)}. A una alícuota de 100 µL se puso en contacto con reactivo de Folin^® (125 µL), carbonato de sodio 19% (p/v) (1 250 µL) y agua destilada (1 525 µL). Se agitó y se dejó reaccionar durante 75 min en oscuridad. Se centrifugó por 10 min a 4 000 rpm, recuperando el sobrenadante y se leyó su absorbancia a 760 nm. Se elaboró una curva patrón de ácido ferúlico (Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA) para expresar los resultados en función de este ácido en mg equivalentes de ácido ferúlico (EAF) por 100 g de MS.

Capacidad antioxidante (CA) método de ABTS

Se evaluó mediante la técnica ABTS (ácido 2,2-azino-bis 3-etilbenzotriazolino-6-sulfónico) según lo descrito por ^{Re et al. (1999)}. Se consideró una lectura al minuto y una segunda 30 min después de iniciada la reacción a una absorbancia de 734 nm. Se calculó el porcentaje de ABTS reducido. Los resultados se expresaron en micromoles equivalentes de Trolox (μmoles ET) (forma soluble del α-tocoferol) por gramo de MS (^{Salinas et al., 2017}).

Análisis estadístico de la información

Se analizaron los datos de las variables de calidad para el único factor de intensidad de color en tres niveles, mediante un diseño completamente al azar con dos repeticiones. Se realizó el análisis de varianza, la comparación de medias Tukey (p≤ 0.05) cuando se presentó significancia en el modelo y un análisis de correlación de variables nutracéuticas con el estadístico SAS, V.9.1 (^{SAS, 2004}).

Características físicas

Las variables asociadas con el color del grano, luminosidad (Lum), ángulo de tono o hue (h°) e índice de saturación de color o croma, presentaron alta significancia (p≤ 0.01), por lo que se tiene variabilidad en el color del grano entre las subpoblaciones de la PO y PF.

Los granos rojo claro (C e I) tienen un aspecto más brillante que los de grano azul (O) (^{Salinas et al. 2012}). En cuanto a los valores de hue (h°) que describe el tono de color, es de los parámetros que mayor asociación guarda con la apreciación visual y los valores de croma se relacionan con el índice de saturación del color, con valores elevados en colores puros y valores bajos en colores mate o de menor pureza (^{Jha, 2010}).

Para la variable h° se observó que, en todos los subgrupos de color, los valores de la PO fueron mayores que los de la PF, lo que significa que el tono rojo naranja de la PO cambió a tono rojo morado en la PF. En el caso de las subpoblaciones C e I, la tendencia fue hacia tonalidades rojo-naranja y en las subpoblaciones O hacia tonalidades en morado. Lo que coincide con lo reportado por ^{Salinas et al. (2013)}, donde separa los valores de tono entre 0° y 25° que corresponden al color morado-rojizo. Los valores de croma de las subpoblaciones C e I de la PO fueron menores con respecto a los correspondientes en la PF, lo que indica un mayor índice de saturación de color.

En cuanto al color determinado en Gcd, ambas poblaciones (PO y PF) mostraron pérdida de Lum de hasta 62% (en subpoblación I de la PO) en relación con los Gcr. A excepción de la subpoblación I de la PF, los Gcd presentaron mayor luminosidad (4.15%) con respecto a los valores obtenidos en los Gcr. ^{Vázquez y Santiago (2013)}, encontraron que el nixtamal lavado fue más luminoso, está pudiera ser la razón por la que el Gcd de está subpoblación (I de la PF) presenta mayor luminosidad. Los valores de h° en Gcd que se presentaron en las subpoblaciones (C= 43.59, I= 54.64 y O= 63.66) de la PF fueron más elevados que los presentados en la PO presentando un tono rojo naranja.

El cambio de tono durante la nixtamalización es debido a que los álcali hidrolizan gran parte del pericarpio, por tanto la determinación del color en Gcd, se realiza en la capa de aleurona que adquiere una tonalidad amarillenta (^{Bonifacio et al. 2005}). Los Gcd de la PF mostraron los valores más altos de croma en las intensidades C e I (18.47 y 18.28), relacionados con tonalidades rojizas y presentaron un color más puro, con respecto a la PO. En el caso de la subpoblación O para ambas poblaciones (PO y PF) en Gcd, presentaron bajos valores de croma (3.21 y 7.86, respectivamente) lo que indica un color mate con menor pureza.

En cuanto al tamaño del grano, fue mayor en las subpoblaciones de la PO que presentaron mayor L y A, ya que la subpoblación O tuvo el mayor valor de L (12.72 mm), seguida las subpoblaciones C e I y en la PF la subpoblación C presentó el menor valor de L (10.28 mm). En tanto que, para el A del grano, la subpoblación I de la PO, presentó los granos más anchos (14.17 mm) contrario a la PF que en la subpoblación I, presentó los granos más angostos (11.67 mm). Sin embargo, para el grosor (G) no hubo significancia, esto es que mediante la técnica de fijación del color, se redujo el tamaño de grano de la PF que presentó granos más cortos y angostos con respecto a la PO y ya que no presentan variación en el G del grano, se considera que esta característica no se modificó.

El promedio del PCG fue mayor en la PO (63.24 g) por sobre la PF (47.03 g). Considerando el PCG como indicador del tamaño del grano (>38 g) (^{Salinas et al. 2010}), los granos de esta raza de maíz son de tamaño grande. La subpoblación O de la PO presentó el mayor PCG (64.25 g). Esto coincide con ^{Bonifacio et al. (2005)} quienes reportaron para maíces de la raza Cacahuacintle con un tipo de endospermo harinoso, un PCG de 60 a 70 g, que comparado con valores de granos ‘duros’ (de 18 a 22 g en Palomero Toluqueño y Arrocillo, respectivamente) y coincidiendo con los valores de L y A, se consideran granos de tamaño ‘grande’, una característica deseable para su utilización en la elaboración de pozole (^{Bonifacio et al., 2005}; ^{Vázquez y Santiago, 2013}; ^{Hernández et al., 2014}).

Los valores de la PF fueron inferiores con respecto a la PO; las subpoblaciones I y O de la PF (43.05 y 43.02 g, respectivamente), fueron los granos con menor PCG. El PCG sugiere el tamaño del grano, y para el proceso de nixtamalización son más favorables los granos de mayor peso (^{Salinas et al., 2013}). El tamaño de grano es una variable de interés en el proceso de nixtamalización, por su impacto en el procesamiento de cocción y absorción de agua. ^{Bonifacio et al. (2005)}, mencionan que la diferencia en el peso del grano se debe verdaderamente al tamaño del grano y no a su densidad. Los promedios del peso hectolítrico (PH), fueron menores en la PO (67.75 kg hL^-1) que los de la PF (70.05 kg hL^-1), Se ha reportado para la raza Cacahuacintle el PH de 60, 59 y 58 kg hL^-1 (^{Bonifacio et al., 2005}; ^{Vázquez y Santiago, 2013}; ^{Hernández et al., 2014}).

Estos valores de PH indican la cantidad de materia seca del grano que hay en un volumen determinado y se considera como una medida indirecta de la dureza del grano de maíz por lo que valores bajos son característicos de granos muy suaves (^{Vázquez y Santiago, 2013}). La HG se consideró por el efecto que tiene sobre las características físicas del grano (^{Hernández et al., 2014}), la PO presentó menor humedad que la PF con 10.6 y 11.27%, respectivamente. El índice de flotación (IF) presentó poca variación sobre las 6 subpoblaciones de ambas poblaciones, la subpoblación I de la PF presentó el valor más alto de 100%, en la misma población la subpoblación O presentó el menor valor (92.67%), lo que indica que los granos tienen la característica indispensable para el floreado del grano que requiere el pozole (Vázquez y Santiago, 2013).

En los maíces pigmentados domina la textura suave, ya que presentan una gran proporción de endospermo harinoso. ^{Wellhausen, et al. (1951)}, encontraron que en la selección por intensidad del color se tiende a mantener una raza pura en lo que respecta al gene del endospermo harinoso. En granos de endospermo harinoso se ha reportado un espesor de pericarpio (EP) de 91.5 µm en la raza Bolita (^{Salinas-Moreno et al., 2003}) coincidiendo con los valores obtenidos en granos claros (C) de la PO y en intermedios (I) de la PF que presentaron valores mayores a 80 µm. En tanto que para maíces clasificados de acuerdo a su uso final como propios para la elaboración de pozole, se reporta un promedio de 43.6 µm (^{Narváez-González et al., 2007}), presentan un contenido de pericarpio menor al promedio de los maíces criollos normales; por tanto, los maíces con menor espesor de pericarpio se consideran más aptos para este fin (^{Vázquez et al., 2014}), la subpoblación C de la PF presentó un EP de 48.6 µm, siendo el que más se asemeja al descrito anteriormente.

Variables tecnológicas para la elaboración de pozole

Las variables sólidas totales del nejayote (STN), tiempo de cocción para floreado (TCF) y granos floreados (GF), mostraron con una significancia de 5% diferencias entre las dos poblaciones. En tanto que el resto de las variables tecnológicas no presentaron significancia, lo que indica la poca variación entre poblaciones para el proceso en la elaboración del pozole. El contenido de STN en promedio fue menor en la PO (6.65 g 100 g^-1) que en la PF (7.46 g 100 g^-1) siendo la subpoblación I de la PO la que presentó menor contenido (5.58 g 100 g^-1) y la subpoblación O de la PF, el mayor contenido (8.42 g 100 g^-1). Se ha reportado para maíz Cacahuacintle contenidos de 4.9 g 100 g^-1. Sin embargo, los valores llegan a ser de 8 a 12% cuando el grano se procesa comercialmente (Pflugfelder et al. 1998), valores similares a los presentados en este estudio.

En los STC se tuvo un contenido promedio de 1.82 y 1.81 g 100 g^-1, en la PO y PF, respectivamente. En otros trabajos se reportan de 2.3 a 3% (^{Hernández et al., 2014}) y de 1.78 a 3.73%. En el caso del caldo de cocimiento del pozole el pericarpio está ausente y los sólidos podrían estar formados por proteínas solubilizadas, almidón y fragmentos de granos reventados (^{Bonifacio et al. 2005}).

En la HGN presentaron valores similares ambos grupos de subpoblaciones con un promedio de 42.02 g 100 g^-1 en la PO y de 41.61 g 100 g^-1 en la PF, por lo que presentaron poca variación en la absorción de agua durante el proceso de nixtamalización. Para la HGC presentaron un promedio de 56.89 y 59.5 g 100 g^-1 en la PO y PF, respectivamente. ^{Vázquez y Santiago (2013)}, indican una correlación positiva entre la humedad del grano y las variables VE y el RGP, debido al tiempo de reposo del nixtamal.

El TCF del grano fue de 53 a 80 min en ambas poblaciones, tiempos muy por debajo de lo reportado en trabajos anteriores, que indican tiempos de 103 a 218 min en grano de maíz Cacahuacintle (^{Bonifacio et al., 2005}; ^{Vázquez y Santiago, 2013}; ^{Hernández et al., 2014}). En cuanto a la reducción del tamaño de grano en PF, podría considerarse que aumentaría el TCF del grano, debido a que ^{Bonifacio et al. (2005)}, confirman que los granos redondeados y globosos son los que requieren menor tiempo de cocimiento para el reventado. Lo que ocurrió en la subpoblación C (75 min), pero en las subpoblaciones I e O presentaron TCF más cortos con respecto a las subpoblaciones de la PO (Cuadro 2), teniendo en cuenta que fue mínima la reducción del tamaño del grano en la PF, por tanto, fue poca la diferencia de los tiempos reportados en subpoblaciones de la PO.

En el rendimiento de grano a pozole (RGP) ambas poblaciones (PO y PF) presentaron valores muy similares en promedio (1.33 kg kg^-1 y 1.4 kg kg^-1, respectivamente), lo que indica que a pesar de las variaciones en cuanto al PCG y el tamaño del grano de ambas poblaciones, presentaron rendimientos similares. La subpoblación O de la PO presentó el mayor valor con 1.48 kg kg^-1, ya que fue la que presentó el grano con mayor L y PCG, en tanto que las subpoblaciones C e I presentaron el menor RGP (1.26 kg kg^-1). En general la PF presentó mayor rendimiento en promedio coincidiendo con la mayor HGC. ^{Vázquez y Santiago (2013)}, reportaron un rendimiento de 1.5 kg de nixtamal kg^-1 de maíz por el método tradicional para la elaboración de pozole en concordancia con sus contenidos de humedad.

En cuanto al volumen de expansión (VE) y porcentaje de granos floreados (GF), hubo diferencia entre poblaciones, ya que PF presentó mayores valores sobre la PO con una diferencia promedio de 10.22 mL para el VE y de 7.97% para GF, presentando una relación proporcional en cuanto al incremento del VE con respecto al mayor porcentaje de GF. A excepción de la subpoblación O de la PO que tuvo un VE de 58.67 mL (el mayor valor), superando al de las subpoblaciones de la PF (C= 53.33, I= 46.67 y O= 50.67 mL) (^{Bonifacio et al., 2005}; ^{Narváez-González et al., 2007}). Sin embargo, el porcentaje de GF de la subpoblación O de la PO fue menor con respecto a VE, ya que las subpoblaciones de PF presentaron mayores porcentajes de GF (Figura 2).

Figura 2 Variables tecnológicas volumen de expansión (VE) y grano floreado (GF) en las subpoblaciones de intensidad C, I y O de las poblaciones original (PO) y final (PF).  

Variables nutracéuticas

Se presentó diferencia en el CAT y la CA, entre el grano de maíz con diferente intensidad de coloración. En este estudio el Gcr de la subpoblación O de ambas poblaciones, presentó el mayor CAT promedio (22.75 mg EPC 100 g^-1 MS) seguido por las subpoblaciones de intensidad I y finalmente las subpoblaciones de intensidad C (17.76 y 12.45 mg EPC 100 g^-1 MS, respectivamente).

En tanto que, para el Gcd, las subpoblaciones de intensidad I presentaron el mayor CAT promedio (6.37 mg EPC 100 g^-1 MS), que el de las subpoblaciones de intensidad O y las de intensidad C (4.95 y 4.01 mg EPC 100g^-1 MS). Presentaron el mismo patrón de comportamiento para CAT ambas poblaciones para Gcr (en el orden O, I y C) y Gcd (I, O y C).

En general tuvo mayor CAT la PO que la PF, tanto para los Gcr como para los Gcd (Figura 3-A).

Figura 3 A) Contenido total de antocianinas (CAT); B) fenoles solubles totales (FST); y C) capacidad antioxidante (CA) en grano de las poblaciones original (PO) y final (PF) en intensidad C, I y O, en grano sin procesar (Cr) y cocido (Cd).  

La diferencia en los valores de CAT, se pueden atribuir a la proporción de diferentes agliconas (antocianidinas), pero también a la estructura química en particular de cada antocianina (^{Salinas et al.2012}). El tamaño del grano afecta la concentración de antocianinas, influye por un efecto de dilución de las antocianinas en la harina del grano usada para la cuantificación (^{Salinas-Moreno et al., 2012}), por lo que se sugiere que el menor CAT es debido al menor tamaño del grano más que por efectos de dilución en subpoblaciones de la PF.

En cuanto al CAT de Gcr comparados con Gcd, tiene relación en cuanto a los TCF, ya que, mediante el proceso de elaboración del pozole en la etapa de nixtamalización, ocurre una primera pérdida de antocianinas debido a la combinación de alcalí y cocción, por efectos de pH e incremento de temperatura (^{Salinas-Moreno et al. 2012}).

En la extracción de antocianinas también se extraen otros compuestos fenólicos y otros flavonoides (^{Salinas-Moreno et al., 2012}) por lo que el contenido de FST es mayor que el CAT, las antocianinas son los fenoles predominantes en el extracto, por tanto, son los principales responsables de la CA (^{Yang y Zhai, 2011}). El mayor contenido de FST (136.3 mg EAF g^-1 MS) lo presentó la subpoblación I de la PF en Gcr; sin embargo, en las subpoblaciones de intensidad C y O, los contenidos de FST fueron menores (108.8 y 119.6 mg EAF g^-1 MS, respectivamente) con respecto a las subpoblaciones de la PO en las mismas intensidades.

La CA es un reflejo de las variables de composición fenólica (CAT y FST), una mayor CA se presentó en granos de la PO que en Gcr, tuvo una diferencia de 1.69 µmoles ET g^-1 MS con respecto a la PF en las subpoblaciones O y de 1.91 µmoles ET g^-1 MS en las subpoblaciones C. En tanto que para las subpoblaciones I, no se presentó mayor variación con apenas una diferencia de 0.01 µmoles ET g^-1 MS entre poblaciones. No se encuentran diferencias significativas de la CA del Gcd en las tres subpoblaciones de la PO con respecto de la PF. Sin embargo, las subpoblaciones de la PO superaron en poco a la PF (Figura 3-C).

Un mayor CAT se asocia con mayor CA (^{Salinas et al. 2012}) Sin embargo, el tipo de pigmento y diferencias en el contenido de pigmento, están relacionadas con la capacidad antioxidante en el grano de maíz, que se deben directamente a los pigmentos (^{Rodríguez et al. 2013}). Por lo que en la población de maíz Elotes Occidentales de este estudio, mostró variación en el CAT y en la CA, debida a la intensidad de color, que presentaron el mismo orden en el contenido de CAT y la CA en las subpoblaciones de la PO, siendo en Gcr O> I> C y en Gcd I> O> C.

En general la PO presentó mayor CAT, contenido de FST y CA que la PF, a excepción de la subpoblación I de la PF en Gcr, que presentó mayor contenido de FST. La CA no es debida solo al CAT, sino al contenido de FST. Por lo que existe una correlación altamente significativa y positiva, entre las variables nutracéuticas de CAT, FST y CA (p< 1%). Dado que en la extracción de antocianinas se extraen conjuntamente ácidos fenólicos y otros flavonoides, el valor de FST es mayor que el de CAT. Sin embargo, las antocianinas son los fenoles predominantes en el extracto, por lo tanto, al incrementarse, aumentan los FST, que son las principales responsables de la CA (^{Salinas-Moreno et al., 2012}

Lo que explica la correlación positiva (r= 0.96; p< 0.01) entre el contenido de FST y la CA, entre CAT y CA (r= 0.91; p< 0.01) y entre CAT y FST (r= 0.83; p< 0.01) (Figura 4).

Figura 4 Gráficas de dispersión de las correlaciones entre las variables nutracéuticas del grano sin procesar y cocido, en las diferentes intensidades de color de las poblaciones original y final.  

Finalmente, mediante el método utilizado de autohermanos se logró uniformizar la intensidad del grano en las diferentes subpoblaciones (C, I y O) de la PF, principalmente en la I, que presentó color en pericarpio y aleurona. Sin embargo, no hubo ganancia por efecto de aditividad del método sobre las variables físicas y nutracéuticas (no presentó mayor CA) por lo que no se superó a la PO. Se considera que el método no es el adecuado para dicho propósito. Tal como lo reportaron ^{Rodríguez et al. (2013)}, en un solo ciclo de selección visual del color del grano, logro incrementar el contenido de antocianinas, pero no en los subsecuentes, ellos explican que aparentemente la variabilidad del contenido de pigmento se agotó en un solo ciclo y no fue posible mejorar más. En el caso de ^{Landi et al. (2008)}, demostraron que la selección recurrente por color de mazorca entre hermanos completos encontró que un solo ciclo de selección condujo a la fijación de los alelos seleccionados.

Sería recomendable la adecuación con otro tipo de método en el que se pudiera incluir las subpoblaciones obtenidas con una fuente genética externa y obtener ganancia por efectos de dominancia mediante la hibridación. Autores como ^{Lago et al. (2014)} refieren que por medio de retrocruzas entre línea endogámica homocigótica dominante como donadora de antocianinas y una variedad de maíz como progenitor recurrente, obtuvieron líneas que acumulaban altos niveles de antocianinas en pericarpio. ^{Espinosa et al. (2009)}, que mediante dialélico directo en cruzas directas y recíprocas, encontraron un efecto significativo en la dirección de la cruza sobre el contenido de antocianinas en aleurona y pericarpio.