Introducción

En 2016, el estado de Michoacán, México, produjo aproximadamente 1 889 353.60 t de aguacate, que representó 80% de la producción total del país (^{SIAP, 2016}). A lo largo de su cadena agroalimentaria, este cultivo genera alrededor de 47 mil empleos directos, 70 mil empleos estacionales y 187 mil empleos indirectos. Los beneficios económicos y sociales de esta industria contrastan con los problemas ambientales derivados del uso excesivo de agroquímicos que se utilizan desde vivero hasta la etapa productiva (^{De la Tejera-Hernández et al., 2013}), además de que la naturaleza volcánica de los suelos donde se cultiva este frutal favorece la lixiviación de los fertilizantes y la contaminación de los mantos freáticos, con el consecuente daño ambiental y a la salud humana (^{Tapia et al., 2012}).

Existen microorganismos que favorecen la nutrición y productividad de los cultivos sin afectar el ecosistema. Los hongos micorrízogenos arbusculares (HMA) son biótrofos obligados de plantas que favorecen el crecimiento radical, con un consecuente aumento en la absorción de agua y nutrientes (^{Gañán et al., 2011}). Favorecen el contenido de clorofila y de elementos en el tejido foliar (^{Díaz et al., 2016}). Los HMA confieren tolerancia a salinidad (^{Medina, 2016}) y sequía mediante la alteración de los perfiles hormonales de las plantas.

La diversidad de los HMA influye en la productividad de las comunidades vegetales de los ecosistemas naturales y agrícolas (^{Lovera y Cuenca, 2007}). En la producción de frutales, la fertilización mineral puede reducirse hasta 25% al utilizar microorganismos benéficos (^{Ramos et al., 2013}; ^{Simó et al., 2015}). Aparentemente, no existe especificidad taxonómica en la simbiosis (^{Lovera y Cuenca, 2007}); sin embargo, mediante estudios de biología molecular se ha demostrado que algunas plantas son colonizadas preferencialmente por ciertas especies de HMA (^{Vandenkoornhuyse et al., 2002}).

En plantas de aguacate (Persea americana var. drymifolia) en vivero, se han demostrado los efectos particulares de Acaulospora delicata, Acaulospora laevis, Glomus badiumy Rhizophagus fasciculatus + Azospirillum al duplicar la biomasa de la raíz y del tallo, mientras que R. irregularis y S. pellucida la triplicaron (^{Carreón-Abud et al., 2014}). Asimismo, D. heterogama, C. etunicatum, C. claroideum y A. scrobiculata favorecieron el desarrollo vegetativo de plantas de aguacate (^{Silveira et al., 2003}), mientras que C. claroideum incrementó en el suelo los contenidos de K, Ca, Cu, Zn y Mn y A. scrobiculata aumentó los contenidos de P, Cu y Zn (^{Silveira et al., 2003}).

Por lo que los HMA son un apoyo importante para la producción agrícola con enfoque sustentable. En huertos de aguacate es necesario conocer la diversidad de este tipo de microorganismos, conocimiento que podría contribuir a la generación de estrategias adecuadas para su conservación, manejo y utilización (^{Chimal-Sánchez et al., 2016}).

Tradicionalmente, la taxonomía de los HMA se ha realizado con base en la morfología de las esporas (^{Rivera et al., 2016}) que considera el tamaño, el color, el acoplamiento de la hifa de sostén, el contenido lipídico y el espesor de la pared celular. La clasificación actual consiste en cuatro órdenes, 11 familias, 27 géneros y alrededor de 261 especies (^{Schüßler y Walker, 2010}; ^{Redecker et al., 2013}).

En México, son escasos los estudios sobre la identificación de géneros de HMA en la zona productora de aguacate de Michoacán, donde las prácticas de manejo intensivo pueden haber ocasionado una pérdida de microorganismos benéficos para las plantas. El objetivo de esta investigación fue determinar la diversidad de especies de HMA asociados al cultivo de aguacate.

Materiales y métodos

Resultados y discusión

En todos los huertos estudiados se encontraron HMA en la rizósfera de los árboles de aguacate. Se identificaron 15 especies de HMA, aunque una se identificó a nivel de género. Pertenecen a cuatro familias y ocho géneros de los órdenes Glomerales y Diversisporales (Cuadro 1).

El mayor número de géneros correspondió a la familia Glomeraceae y el género Glomus fue el más abundante con tres especies, mientras que Septoglomus y Acaulospora, este último de la familia Acaulosporaceae, fueron los menos comunes con una especie (Figura 1).

Figura 1 A) Entrophospora infrequens; B) Claroideoglomus clarum; C) Diversispora spurca; D) Septoglomus constrictum; E) Tricispora nevadensis; F) Claroideoglomus claroideum; G) Diversispora aurantia; H) Claroidedglomus etunicatum; I) Glomus sp.; J) Funneliformis mosseae; K) Acaulospora scrobiculata; L) Glomus macrocarpon; M) Funneliformis geosporum; N) Sclerocystis sinuosa; y Ñ) Glomus badium.  

Claroideoglomus etunicatum y G. macrocarpon son reportadas por primera vez en el cultivo de aguacate se encontraron en los diez sitios de muestreo, por lo que se pueden considerar como capaces de sobrevivir y formar esporas bajo condiciones diversas, además de competir eficientemente y asegurar el éxito de la colonización, Al respecto, ^{Kahiluoto et al. (2001)}; ^{Opik et al. (2006)} mencionan que el género Glomus tiene una amplia distribución, por lo que se le ha considerado como generalista debido a que sus especies presentan un amplio rango de adaptación en cuanto al tipo de suelo y a las condiciones edafoclimáticas.

La dominancia de Glomus en los suelos agrícolas estudiados se debe posiblemente a que cuenta con un micelio extrarradical que coloniza, mientras que otros géneros como Gigaspora se desarrollan frecuentemente a partir de esporas (^{Hart y Reader, 2002}; ^{Pérez-Luna et al., 2012}). La diversidad de especies de HMA encontradas en este trabajo, coinciden con los valores reportados por ^{González-Cortés et al. (2012)} en suelos que presentan perturbación, debido a que originalmente la vegetación era de bosque de pino, posteriormente para cultivo de maíz y desde hace aproximadamente 30 años se establecieron huertos de aguacate con diferente manejo agronómico.

Claroideoglomus etunicatum, se ha reportado en suelos asociados al cultivo de Agave cupreata en regiones mezcaleras del estado de Michoacán, México, las características más sobresalientes de C. etunicatum son sus esporas, las cuales nacen individualmente en el suelo de color amarillo pálido a amarillo, de forma globosa a subglobosa (75-) 95 (-135) μm de diámetro, ocasionalmente ovoide, 110-160 x 140-180 μm, con una hifa subyacente, la estructura subcellular de la espora consiste en una pared de esporas compuesta de dos capas.

La capa 1 mucilaginosa, rugosa en la superficie superior, hialina, 0.5-2.5 μm de espesor, la capa 2, lisa en ambas superficies, amarillo pálido a amarillo y de (4.5-) 5.7 (-6.5) μm de espesor. Sin embargo, en el reactivo de melzer, solo la capa 1 tiñe de rojo rojizo a rojo apagado, por el contrario G. macrocarpon sus esporas raramente se encuentran individuales en el suelo, por lo general en esporocarpos que contienen 2-15 esporas distribuidos al azar.

Estas esporas son amarillas, globosas a subglobosas de (110) 115 (-120) micra de diámetro, raramente ovoide o en forma de pera, 100-110 x 115-130 micras. La capa uno es un poco semiflexible, hialina (1.2-) 1.5 (-1.7) µm de espesor, la capa dos laminada, lisa, de color amarillo (4.7-) 6.6 (-7.6) mµ de espesor. Ninguna de las dos capas reacciona al reactivo Melzer.

Otras especies de HMA reportadas primera vez en aguacate son: C. clarum, C. claroideum, S. constrictum; sin embargo, estas especies ya habían sido reportadas en ecosistemas naturales y agroecosistemas en parcelas de maíz, áreas de vegetación secundaria y selva baja caducifolia (^{Guadarrama-Chávez et al., 2007}; ^{Pérez-Luna et al., 2012}; ^{Chimal-Sánchez et al., 2015}).

Mientras que T. nevadensis, D. aurantia y G. citrícola se reportan por primera vez para México. La especie D. aurantia fue reconocida por la profundidad de color naranja a dorado color amarillo de sus esporas, su superficie lisa y su sensación coriácea relativamente gruesa (^{Walker, 1987}), las esporas tienen tres capas, de las cuales, la tercera es flexible a semiflexible (Błaszkowski, 2012).

Por otra parte, T. nevadensises se caracteriza por sus esporas de color marrón amarillo a marrón, 90-115 µm de diámetro, con dos ó tres capas, conspicuas, 6-12 µm de largo, las proyecciones de la espina que se extienden sobre la pared exterior es hialina a subhialina, Paredes y OWL3 OWL2 capas de mancha de color marrón rojizo en el reactivo de Melzer, mientras que la capa exterior OTB1 no mancha o ligeramente rosado; esta especie solamente se había aislado de la rizósfera de Plantago nivalis (Plantaginaceae) y Alchemilla fontquer (Rosaceae) en la Sierra Nevada, Región de Andalucía, España (^{Palenzuela et al., 2010}), en una zona a 3 000 m de altitud, en suelos ácido (pH de 5.1 a 6.5), altos contenidos de materia orgánica (7.1 a 22.8%) y alta humedad.

Estas condiciones edafoclimáticas coinciden con la zona de estudio, a pesar de estar a menor altitud (1592 m). En la Figura 1 se aprecia la T. nevadensis que se caracteriza por formar ornamentación con proyecciones espinosas en la superficie exterior de las esporas (^{Palenzuela et al., 2010}).

El índice de Shannon-Weaver obtenido fue alto (3.192), comparado con los reportados por ^{Pérez-Luna et al. (2012)} en el cultivo de maíz bajo diferentes tratamientos (1.22 a 1.64) y a los índices de similitud reportados por ^{González-Cortés et al. (2012)} en bosque y huertos de aguacate (0.88) y cultivo de maíz-aguacate (0.65). Se puede inferir en este análisis que las poblaciones dominantes están en simbiosis activa bajo las condiciones evaluadas (Cuadro 2) teniendo en cuenta lo anterior, los géneros dominantes bajo las condiciones edáficas son en su orden: Glomus y Claroideoglomus.

La diversidad taxonómica puede ser afectada por las prácticas agrícolas, la aplicación de fungicidas, así como por el cultivo de especies no micotróficas y el establecimiento de monocultivos; estos factores causan en un cultivo la pérdida o disminución de la diversidad de HMA debido a la presión de selección que se ejerce sobre ellos (^{Varela y Trejo, 2001}; ^{Guadarrama-Chávez et al., 2007}; ^{Oehl et al., 2011}; ^{Pérez-Luna et al., 2012}).

En la zona de estudio se tiene como antecedente que, antes de ser establecido el cultivo aguacate como monocultivo, la cubierta vegetal estaba formada por un bosque mixto de pino-encino, así como por bosques de oyamel, de encino y mesófilo de montaña (^{Chávez-León et al., 2012}). ^{Bautista-Cruz et al. (2014)} señalan que las morfoespecies de Glomus, Scutellospora, Diversispora y Gigaspora fueron encontradas en bosques mesofilos de montaña. Estos bosques sufrieron un cambio en el uso de suelo, ya que en ellos de establecieron cultivos de maíz, lo que ocasionó una alteración en las comunidades de HMA (^{González-Cortés et al., 2012}). En estos mismos suelos se estableció el cultivo de aguacate.

Acaulospora scrobiculata presentó una abundancia relativa de 1.5% (Cuadro 2), lo que contrasta con lo reportado por ^{González-Cortés et al. (2012)}, quienes reportan alta frecuencia de A. laevis, A. scrobiculata y A. spinosa en sitios asociados al cultivo de aguacate. Estas diferencias pueden atribuirse a la variación en las características del suelo, que, a pesar de tener similar pH, el contenido de materia orgánica fue mayor en los suelos de nuestro estudio y menor el contenido de P-total. Atributo por lo anterior, estas especies se pueden considerar dominantes.

Las condiciones ambientales y características fisicoquímicas del suelo pueden ser determinantes en la abundancia de especies, se ha encontrado que en suelos con pH mayor de 7 es mayor la abundancia de especies del género Acaulospora que a pH menores, en los cuales las especies como A. scrobiculares aumentan su frecuencia (^{González-Cortés et al., 2012}).

Conclusiones

Existe gran diversidad de HMA en huertos de aguacate de Uruapan. Se identificaron 15 morfoespecies de HMA en la rizósfera de árboles de aguacate, la familia predominante fue Glomeraceae, que mostró la mayor diversidad, seguida por Diversisporaceae.

Las siete nuevas especies que se reportan en el cultivo de aguacate son Claroideoglomus clarum, C. claroideum, Diversispora aurantia, Septoglomus constrictum, Entrophospora nevadensis, Claroideoglomus etunicatumy G. citricola. Las especies Diversispora aurantia y Tricispora nevadensisse registran, por primera vez, en México.