INTRODUCCIÓN

Las enfermedades infecciosas provocadas por microorganismos, han sido unas de las causas más importantes de muerte en la humanidad (^{Lozano et al., 2012}). Los agentes bacterianos incluyendo Staphylococcus aureus, Escherichia coli, Pseudonomas aeruginosa, Bacillus subtilis y Proteus vulgaris han provocado enfermedades infecciosas importantes dentro de la salud pública (^{Khan et al., 2013}).

La introducción de agentes antimicrobianos en la medicina, ha sido una de las intervenciones más importantes para controlar y disminuir la prevalencia de las enfermedades infecciosas (Alós, 2015); sin embargo, una amenaza creciente en los últimos años que ha disminuido la eficacia de estos fármacos, es la resistencia bacteriana a los antibióticos; generada debido a que los microorganismos han adquirido la capacidad para evitar que un antimicrobiano actúe contra él. Como resultado, los tratamientos de elección se vuelven ineficaces, las infecciones persisten y pueden extenderse a otros individuos (^{WHO, 2017}).

En la mayoría de las poblaciones de diferentes países en desarrollo, la humanidad ha usado plantas para tratar enfermedades infecciosas comunes, que podrían ser una alternativa potencial para producir nuevos fármacos de gran beneficio a la salud (^{Renisheya et al., 2011}; ^{Khan et al., 2013}).

Una de las plantas considerada importantes para el estudio de sus propiedades fotoquímicas es Salix babylonica, conocido comúnmente como Sauce llorón. Esta especie pertenece al género Salix de la familia Salicáceas, Salix babylonica es una de las especies más conocidas dentro de los sauces, distribuido en algunas zonas de Asia, Europa y América; utilizada comúnmente como planta ornamental y medicinal (^{Wahab et al., 2018}).

Existen reportes en los que se evidencian las propiedades farmacológicas asociadas a la evaluación de extractos de hojas, corteza y tallos; obtenidos a partir de Salix babylonica. Dentro de las propiedades fitoquímicas atribuibles a Salix babylonica, se encuentran: actividad antihelmíntica, antiséptica, antiartrítica, astringente, analgésica, anticancerígena, antipirética, antimalaria, antioxidante, antimicótica, antihelmíntica y antibacteriana; estas propiedades su asocian a su contenido de compuestos secundarios como fenólicos totales, flavonoides, terpenos y lignanos (^{Sulaiman et al., 2013}; ^{Wahab et al., 2018}).

Con base en los planteamientos anteriormente mencionados, el objetivo del presente trabajo de investigación fue caracterizar y determinar la actividad antibacteriana del extracto metanólico de Salix babylonica, sobre bacterias de importancia en salud pública.

MATERIAL Y MÉTODOS

RESULTADOS

La caracterización cualitativa realizada al extracto metanólico de Salix babylonica, indican la presencia de insaturaciones, oxidrilos fenólicos, cumarinas, lactonas, flavonoles, quinonas, saponinas, aromaticidad y polifenoles; además de ser positivo a la prueba de Lieberman-Buchard, la cual indica la presencia de triterpenos y compuestos esteroidales. (Cuadro 2).

DISCUSIÓN

Por medio de las pruebas cualitativas se determinó la presencia de insaturaciones, oxidrilos fenólicos, cumarinas, lactonas, flavonoles, quinonas, fluorataninos, esteroides triterpenos y saponinas en el extracto metonólico de Salix babylonica. En estudios previos se han identificado compuestos como tritetracontano, 1,2,3-propanetriol éster ácido octadecanoico, éster metílico del ácido hexadecanoico y 1,3-dioxano-4-(hexadecil oxi)-2-pentadecilo; la mayoría de ellos clasificados como compuestos fenólicos, además de 7-O-β-D-glucopiranosido de luteolina, luteolina y crisoeriol; compuestos clasificados como flavonoides (^{Salem et al., 2011}).

Se han reportado actividades biológicas como anticancerígena, antiulcerosa, antimalaria, antidiarreica, antimicótica, antitusígena, antinflamatoria, antihelmíntica y antibacteriana; en estudios realizados con compuestos fenólicos, alcaloides, glicósidos y terpenos (^{Hernández-Alvarado et al., 2018}).

Por otro lado, la cromatografía de gases permitió identificar Timol y Carvacrol a concentraciones de 0.5319 mg/ml, 0.4158 mg/ml respectivamente. Estos compuestos están clasificados como aceites esenciales de naturaleza volátil, con algunas actividades biológicas reportadas como: expectorantes, antifúngicas, antiinflamatorias, analgésicas, antisépticas, antioxidantes, antirreumáticas, antiespasmódico, anti-hepatotoxicas y antibacterianas; tanto frente a bacterias Gram positivas como Gram negativas (^{Magi et al., 2015}).

Al realizar la evaluación antibacteriana del extracto metanólico de Salix babylonica, se determinó que el extracto presenta mejor actividad frente a bacterias Gram positivas (Staphylococcus aureus, Listeria monocytogenes y Bacillus subtilis); que contra bacterias Gram negativas (Escherichia coli, Salmonella typhi, Salmonella cholerasuis, Pseudomonas aeruginosa). Este efecto se fundamenta en la estructura propia de las bacterias Gram negativas, que al contar con una membrana fosfolipídica que impide que la pared celular sea penetrada por solutos lipofílicos; mientras las porinas constituyen una barrera selectiva para los solutos hidrofílicos, por lo que la bacteria está protegida de ser penetrada por compuestos como antibióticos o algunos metabolitos secundarios derivados de las plantas (^{Kaye et al., 2004}; ^{Ndhlala et al., 2015}).

Para la determinacion de la actividad antibacteriana, es importante determinar Concentracion Minima Inhibitoria (CMI) y la Concentracion Minima Bactericida (CMB); definiéndose como CMI a la concentración más baja de agente antimicrobiano que inhibe el crecimiento del microorganismo, detectados de forma visual (^{CLSI, 2012}). En el presente experimento para determinar el punto final de la CMI, se empleó un método colorimétrico, basado en el uso de sales de tetrazolium (^{Balouiri et al., 2016}); el cual permite observar un cambio de color de amarillo a rosa, provocado por la entrada de esta sal en la célula, la cual se reduce por las oxidorreductasas dependientes de NAD(P)H y las deshidrogenasas de las células metabólicamente activas, produciendo el cambio de color a rosa (^{Berridge et al., 2005}).

^{Sulaiman et al., en 2013}, realizaron un estudio en el cual evaluaron la actividad antimicrobiana del extracto etanólico de corteza de Sálix alba, perteneciente al género sálix y familia salicaeae; igual que Sálix babylonica. En dicho estudio determinaron que Sálix alba tiene mejor actividad antibacteriana contra Staphylococcus aureus; mediana actividad contra Pseudomonas aeruginosa y no presentó efecto contra Escherichia coli y Klebsiella pneumoniae. Las concentraciones evaluadas fueron 10, 20, 40, 60 y 80 mg/ml, utilizando la técnica de difusión en agar; observándose los mayores halos de inhibición a 80 mg/ml. Los resultados de dicho estudio correponden con los observados en el presente experimento, ya que el extracto tuvo mejor efecto contra las bacterias Gram positivas (Staphylococcus aureus, 25 mg/ml; Listeria monocytogenes, 25 mg/ml y Bacillus subtilis, 12.5 mg/ml), que contra las bacterias Gram negativas (Escherichia coli, Salmonella typhi, Salmonella cholerasuis y Pseudomonas aeruginosa, 100mg/ml, para cada una); sin embargo, el extracto se obtuvo de la corteza de Sálix alba. Las concentraciones cambian y la técnica también, por lo que los resultados no son 100% comparables, aunque las arbóreas pertenecen al mismo género y familia.

Por otro lado, en un estudio realizado por ^{Wahab y colaboradores en 2018}, quienes evaluaron los extractos metanólicos de las hojas y la corteza de Sálix babylonica; además de sus fracciones de éter de petróleo, cloruro de metileno y acetato de etilo (diluidos en dimetilsulfóxido), para determinar su actividad antimicrobiana frente a bacterias Gram positivas (Staphylococcus aureus) y Gram negativas (Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae y Pseudomonas aeruginosa), utilizando la técnica de difusión en agar y el extracto a una concentracion de 100 µg. Los resultados mostraron que tanto el extracto metanólico de las hojas y de la corteza tienen actividad antimicrobiana de moderada o débil, contra los microorganismos desafiados; observándose los mayores halos de inhibición (10 mm) con Pseudomonas aeruginosa, seguida de Klebsiella pneumoniae (9 mm), finalmente Escherichia coli, Staphylococcus aureus (8 mm).

Debido a que en los estudios mencionados únicamente se aplican técnicas para determinar la sensibilidad del microorganismo a determinado compuesto por el método de difusión en agar; no es posible comparar los resultados con los obtenidos en el presente experimento, ya que en el presente se determinó la concentración mínima inhibitoria por el método de microdilución en placa; además de que en el estudio de Wahab y colaboradores, se utilizó dimetil sulfóxido, para diluir los extractos y fracciones; compuesto que se utiliza para incrementar la permeabilidad de la membrana bacteriana, incrementando la actividad de los compuestos y reduciendo las concentraciones de uso (^{Borges et al., 2013}; ^{Sulaiman et al., 2013}; ^{Wahab et al., 2018}).

La Concentracion Minima Inhibitoria, se define como la concentración más baja de agente antimicrobiano-necesaria para matar el 99,9% del inóculo final, después de la incubación durante 24 h bajo un conjunto estandarizado de condiciones descrito por el CLSI (^{Balouiri et al., 2016}). La determinacion de la CMI no es una opción viable para conocer al 100% la eficacia de un fármaco o compuesto, ya que dentro de cada pozo todavía puede haber células viables si el fármaco evaluado solo tuvo un efecto bacteriostático sobre las especies bacterianas en estudio (^{Wiegand et al., 2008}).

En el presente experimento se determiaron las CMB del extracto metanólico, frente a Escherichia coli, Salmonella typhi, Salmonella cholerasuis y Pseudomonas aeruginosa (200 mg/ml); Listeria monocytogenes y Staphylococcus aureus (50 mg/ml) y Bacillus subtillis (25 mg/ml); sin embargo, no existen estudios reportados con Sálix babylonica u otra especie del género Sálix, con el cual se haya reportado dicha actividad.

CONCLUSIÓN

En el presente estudio se demostró que el extracto metanólico de Sálix babylonica tiene actividad antibacteriana potencial sobre algunos patógenos bacterianos de importancia en salud pública; siendo una alternativa para el tratamiento de enfermedades producidas por bacterias resistentes o multirresistentes a antibióticos.